中文摘要：

本课题为筛选及验证镍致癌特异相关的甲基化基因,利用已建立的结晶型NiS诱发的人体细胞恶性转化模型，通过免疫荧光、SssI甲基转移酶法、甲基化DNA 免疫沉淀法等方法，发现在细胞恶性转化过程中整体基因组DNA甲基化水平逐渐降低，局部CpG岛高甲基化，揭示了表观遗传模式参与控制人类细胞的恶性表型。通过ChIP-AIMS方法筛选出二十余种镍诱发细胞恶性转化差异甲基化基因，其中重点研究了DNA修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶(hMGMT)，利用MethyLight、亚硫酸氢盐测序法确定hMGMT基因启动子CpG岛高甲基化，进一步利用RNAi技术、免疫印迹法等方法发现DNA甲基化酶DNMT1介导并与甲基化DNA结合蛋白共同维持hMGMT基因启动子CpG岛高甲基化。此外，组蛋白修饰异常也介导了hMGMT基因的表观遗传沉默。本研究为镍致癌表观遗传机制的阐明提供了新的资料；并为MGMT基因DNA甲基化作为一种候选的表观遗传生物标记物应用于镍作业人群的研究提供理论依据；同时亦为其它致癌物表观遗传机制的研究提供了可供借鉴的模式。