转基因家蚕FiL-GAL4>UAS-Ras1CA后部丝腺变大、丝蛋白合成增加、蚕丝产量提高,有较好的应用前景。为挖掘提高蚕丝产量的更佳候选基因,拟对Fil-GAL4>UAS-Ras1CA的后部丝腺进行转录组和蛋白组分析,进一步解析其提高蚕丝产量的分子机理。转录组学初步结果显示后部丝腺中超表达Ras1CA可抑制幼虫-蛹变态时期蜕皮激素(20E)反应基因的表达;将确定哪条Ras1下游信号(Raf-MAPK或PI3K-TORC1)抑制20E信号传导、以及20E诱导的细胞自噬和凋亡。蛋白组学初步结果显示半胱氨酸蛋白酶抑制剂BCPI的蛋白水平上调,BCPI mRNA发育变化结果暗示其受20E信号调控;将解析哪条Ras1下游信号与20E信号协同调控BCPI抑制的细胞解离。最终,在后部丝腺中超表达EcRDN,检测抑制20E信号及其促进的细胞自噬、凋亡和解离是否可以提高蚕丝产量。
英文主题词Bombyx;Ras1CA;posterior silk gland;proteome;transcriptome