脂筏在动物细胞内起着重要的生物学功能,如信号传导、蛋白投递等,也被某些病原物或毒素利用作为其在细胞膜上的浓缩装置或进入细胞内的途径。Bt毒素Cry1Ac可能也利用脂筏这一平台。本项目拟研究棉铃虫幼虫中肠脂筏在Bt毒素寡聚体形成中所起的作用。通过研究改进了原来的脂筏制备方法,建立了简便快速的脂筏制备技术;分析了棉铃虫等鳞翅目幼虫中肠脂筏的理化性质,发现在鳞翅目昆虫中幼虫脂筏在生化上具有相似的特征;研究发现棉铃虫敏感品系与抗性品系的BBMV都能促进毒素寡聚体的形成,但抗性品系上形成的寡聚体较弱,但单独的脂筏不能形成寡聚体;PIPLC处理后的BBMV也不能促进寡聚体的形成,即Bt毒素Cry1Ac寡聚体的形成需要氨肽酶N的参与;采用脂筏的破坏剂处理BBMV后寡聚体便不能形成,说明寡聚体的形成需要脂筏的完整性,并需要与非脂筏部分的共同作用。比较了棉铃虫抗性品系与敏感品系间酶活性差异和对Cry1Ac毒素的降低速度,发现抗性品系棉铃虫的中肠液与BBMV具更高的蛋白酶活性,并且抗性品系降解毒素的速度快于敏感品系,而2品系间对原毒素的活化没有差异,提出了Bt抗性的又一机制。
英文主题词Raft; BBMV; Cry1Ac; toxin Oligomer; Helicoverpa armigera