中文摘要：

p28GANK是近年发现在肝癌内高表达的癌基因。本人发现了其在肝癌内的缺失突变体p28-II，已收录入GenBank。本组前期工作提示p28GANK与细胞周期因子依赖性激酶CDK4相互作用。在本项目中将通过GST pull-down实验确定p28GANK与CDK4发生作用的蛋白区段；基于p28GANK与抑癌基因p16INK4a都具有ankyrin重复序列，将通过体外翻译及体内诱导表达的方法研究p28GANK与p16INK4a是否竞争性结合CDK4；进一步将通过体外磷酸化实验确定p28GANK与CDK4结合后对CDK4磷酸化Rb底物的影响。通过以上研究有助于重新认识细胞周期重要激酶CDK4在肿瘤内的调控方式，加深理解p28GANK参与的细胞周期紊乱，尤其是经典的CDK4-cyclinD-p16INK4a-Rb信号转导通路的异常对肝癌发生的潜在作用，为基于细胞周期调控的肝癌生物治疗提供新思路。

结论摘要：

p28GANK最早作为非ATP酶亚基在26S蛋白酶体中被发现。我们发现并报道它在人肝癌中表达上调，可以作为鉴定肝细胞来源肝癌的诊断标记物。本课题研究进一步揭示了p28GANK与抑癌蛋白RB结合，并通过核转位机制与核RB表达量相关。应用腺病毒介导RNA干扰使p28GANK的表达在五种肝癌细胞系中下降80%，抑制了细胞生长和致瘤性，促进了RB的去磷酸化，使G1/S进展相关转录因子E2F-1的转录活性下降。干扰p28GANK可诱导caspase-8和caspase-9介导的肝癌细胞凋亡。在国际上首次发现并报道腺病毒介导RNA干扰p28GANK原位注射荷瘤裸鼠可以抑制肿瘤生长，提出p28GANK可能作为潜在肝癌生物治疗的重要靶点。在大鼠肝卵圆细胞激活模型中发现p28GANK的表达与肝卵圆细胞介导的肝再生密切相关。肝卵圆细胞的体外培养显示，在表皮生长因子的刺激下，p28GANK的上调与CDK4，cyclinD1的上调，Rb蛋白的下调的时间相吻合，提示p28GANK在肝卵圆细胞介导的肝再生及肝卵圆细胞的周期进展中具有重要作用。