中文摘要：

目前发现淋巴内皮生长因子在肿瘤淋巴路转移中发挥重要作用；Hedgehog通路（Hh通路）能上调多个淋巴内皮生长因子的表达；本实验室前期研究发现Hh通路活化与胰腺癌淋巴结转移显著相关，提示该通路可能参与胰腺癌的淋巴结转移。本项目采用Real-time PCR、Western Blot、RNA干扰、免疫组化、活体荧光成像等方法，对Hh通路促进胰腺癌淋巴结转移的机制进行研究。首先刺激或阻断胰腺癌细胞Hh通路，观察癌细胞中Hh通路不同程度活化对淋巴内皮生长因子表达水平的影响，及其对淋巴内皮细胞体外增殖、迁移、管腔样结构形成的影响；然后建立高表达和低表达Hh通路的胰腺癌原位移植瘤模型，观察癌组织中Hh通路不同程度活化对淋巴内皮生长因子表达的影响，及对淋巴管新生、淋巴结增生及胰腺癌淋巴结转移的影响。旨在探讨位于淋巴内皮生长因子上游的Hh通路在胰腺癌淋巴结转移中的作用，为抗胰腺癌转移治疗提供理论依据。

结论摘要：

Hedgehog信号通路能促进多个淋巴内皮生长因子的表达，而淋巴内皮生长因子在肿瘤的淋巴路转移中发挥着重要作用。我们前期研究发现，Hh信号通路活化与胰腺癌的淋巴结转移显著相关，提示该通路可能参与胰腺癌的淋巴结转移，但其机制尚未完全阐明。本研究发现，活化hedgehog通路能促进胰腺癌SW1990细胞分泌VEGF-C，从而促进与SW1990细胞共培养的淋巴内皮细胞的增殖迁移、管腔结构形成，而感染GLI1siRNA腺病毒后SW1990细胞GLI1蛋白的表达明显降低，上清液中VEGF-C的活性也显著降低，提示GLI1siRNA腺病毒通过抑制hedgehog通路抑制了SW1990细胞VEGF-C蛋白的表达。进一步建立SW1990-GFP组、SHH-SW1990组、GLI1siRNA-SW1990组裸鼠胰腺癌原位移植瘤模型，结果SHH-SW1990组肿瘤GLI1及VEGF-C蛋白表达均显著高于SW1990-GFP组肿瘤，而GLI1siRNA-SW1990组肿瘤GLI1及VEGF-C蛋白表达均显著低于SW1990-GFP组肿瘤。SHH-SW1990组肿瘤瘤周淋巴管增生显著多于SW1990-GFP组肿瘤，转移至淋巴结的癌细胞数显著多于SW1990-GFP组肿瘤，其LVD显著高于SW1990-GFP组肿瘤，而GLI1siRNA-SW1990组肿瘤瘤周淋巴管增生显著低于SW1990-GFP组肿瘤，转移至淋巴结的癌细胞数显著少于SW1990-GFP组肿瘤，其LVD显著低于SW1990-GFP组肿瘤，提示Hh通路活化可促进VEGF-C的表达从而促进胰腺癌瘤周淋巴管新生及癌细胞的淋巴结转移。