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根癌农杆菌介导的哈茨木霉菌遗传转化的研究
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:中国生物工程杂志
  • 时间:0
  • 页码:38-43
  • 语言:中文
  • 分类:Q933[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院环发所,北京100081, [2]河北省科学院生物所,石家庄050081, [3]中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100094
  • 相关基金:“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD08A02),国家“863”计划(2006AA10A211),国家自然科学基金(30671400),资助项目
  • 相关项目:木霉菌厚垣孢子形成相关基因克隆及功能研究
中文摘要:

利用根癌农杆菌EHAl05进行了哈茨木霉Th-33的转化,在优化的转化条件下,EHA105对木霉菌的转化效率约45-100个转化子/10^6个孢子。利用该方法已建立了含4000多个转化子的木霉T-DNA插入突变体库。随机挑选24个转化子进行遗传稳定性分析,结果显示转化子经过5代无选择压力连续转接后都能在选择平板上正常生长;潮霉素抗性基因的PCR扩增和Southernblot分析表明,木霉转化子含有该基因,Southernblot进一步表明转化子多为单拷贝随机插入。该转化体系的改进将有利于木霉菌生防功能基因的克隆和作用机制的研究。

英文摘要:

Filamentous fungus Trichoderma harzianum Th-33 was successfully transformed with Agrobacterium tumefaciens EHA105 for random integration of transforming DNA(T-DNA). Co-cultivation of T. harzianum Th-33 conidia with A. tumefaciens EHA105 in the presence of acetosyringone resulted in the formation of hygromycin B-resistant fungal colonies with high transformation frequency( about 45 -100 transformants per 10^6 conidia). T-DNA insertional library of T. harzianum Th-33 mediated by A. consisted of more than 4000 transformants. Twenty-four randomly selected resistant clones were proved to be stable through five generations mitotic cell division. The integration of the hph gene into harzianum genome was determined by PCR and Southern blot analysis. The results showed that T-DNA was inserted into all the transformants with random and single copy mainly. These suggest that A. potentially powerful tool towards ns mediated transformation is a mutagenesis and gene clone for T. harzianum.

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期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959