中文摘要：

木霉是全世界研究与应用最多的植病生防真菌，木霉孢子是其产品的主要有效成分。研究木霉的高效遗传转化体系对其功能基因克隆与应用及产业化具有重要的理论和应用价值。项目研究了影响农杆菌介导哈茨木霉遗传转化的各种因子，获得了一套转化效率达60-200个转化子/106孢子的高效遗传转化体系，转化子遗传稳定。PCR检测表明T-DNA以1-3拷贝插入木霉基因组，约80%为单拷贝插入。建立了13000多株T-DNA转化子的哈茨木霉突变体库。对库中4500多株转化子发酵检测，未发现产厚垣孢子明显变化的突变子；对5000株转化子的培养检测，获得了10株产分生孢子显著减少的突变子；对3359株转化子筛选，获得了54株对立枯丝核菌拮抗作用发生明显变异的突变子。采用TAIL-PCR方法对一株产孢突变子T-DNA插入基因进行了扩增，获得了2243bp侧翼系列，序列比对表明有219-231bp与Hypocrea jecorina clone的基因组部分序列有95%-97%的同源性；编码的蛋白中有361个氨基酸与Gibberella zeae PH-1编码的假定蛋白 FG02527.1有87%的相似性。