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胶质细胞源性营养因子及内皮素B受体基因共转染神经干细胞实验研究
  • ISSN号:1005-8982
  • 期刊名称:《中国现代医学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R781[医药卫生—口腔医学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学同济医学院附属协和医院腔镜外科,湖北武汉430030
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No:30371397)
中文摘要:

目的探讨神经干细胞转染的新方法,并观察转染后目的基因的表达情况。方法原代培养神经千细胞,运用jet PEI转染试剂将目的基因胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和内皮素B受体基因(EDNRB基因)共转染至神经干细胞内,免疫荧光显微镜观察、流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,测定转染效率,RT-PCR检测目的基因表迭情况。结果成功培养出可用于基因转染的神经干细胞,转染后24h即可在免疫荧光显微镜下观察到GFP表达,流式细胞仪显示24、48和72h转染效率分别为15.36%、24.67%和25.73%。RT—PCR显示目的基因在神经干细胞内成功表达。结论运用jet PEI成功将目的基因转染至神经干细胞内,为相关神经变性疾病的基因治疗打下了实验基础。

英文摘要:

[Objectives] To investigate the optimizing method of neural stem eel/(NSC) transfection and the expression of extrinsic genes in neural stem cells. [Methods] Extrinsie genes GDNF and EDNRB were eotransfeeted into primary Cultured neural stem ceils by using jet PEI. The expression of green fluorescent protein (GFP) was measured with fluorescence microscope and flow eytometer. To detect the expression of mRNA of GDNF and EDNRB by RT-PCR. [Results] Bright green fluorescence of the transfected eells could be observed under fluorescence mieroscope after 24 h of transfeetion. Flow cytometer analysis showed that the effieieney of eotransfeetion were 15.36%, 24.67%, 25.73% in 24, 48 and 72 hours respectively. Meanwhile the expression of GDNF and EDNRB genes were detected in neural stem ceils by RT-PCR. [Conclusions] The target genes were successfully eotransfeeted into neural stem cells by using jet PEI. It provides a feasible technological platform for the polygene therapy of neural degenerative diseases.

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期刊信息
  • 《中国现代医学杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学 中南大学 中华人民共和国卫生部肝胆肠外科研究中心
  • 主编:陈子华
  • 地址:湖南省长沙市湘雅路87号
  • 邮编:410008
  • 邮箱:cjmm@2118.cn
  • 电话:0731-4327993 4803066
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-8982
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1225/R
  • 邮发代号:42-143
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:59532