先天性巨结肠是一种神经嵴细胞源性疾病和多基因遗传病,胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和内皮素B受体基因(EDNRB基因)的缺失导致肠神经系统发育异常。神经干细胞移植不仅可以从解剖和功能上修复神经系统,还可以作为基因转染的载体。因而本课题以花斑鼠为先天性巨结肠模型,在体外构建质粒pCDNA3.1- EDNRB和pCDNA3.1- GDNF,将GDNF基因和EDNRB基因重组于含内在核糖体进入位点(IRES)逆转录病毒载体pLXSN质粒中;同时从大鼠胚胎分离、培养神经干细胞,将携带GDNF基因和EDNRB基因的逆转录病毒载体转染神经干细胞,然后移植于花斑鼠结肠壁内,观察花斑鼠结肠神经再生的情况。本课题旨在探讨多基因联合导入神经干细胞移植对结肠神经再生的机制,为先天性巨结肠治疗提供新的有效办法。
先天性巨结肠是一种神经嵴细胞源性疾病和多基因遗传病,胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和内皮素B 受体基因(EDNRB 基因)的缺失导致肠神经系统发育异常。神经干细胞移植不仅可以从解剖和功能上修复神经系统,还可以作为基因转染的载体。因而本课题以花斑鼠为先天性巨结肠模型,在体外构建质粒pCDNA3.1- EDNRB 和pCDNA3.1- GDNF,将GDNF 基因和EDNRB 基因重组于含内在核糖体进入位点(IRES)逆转录病毒载体pLXSN 质粒中;同时从大鼠胚胎分离、培养神经干细胞,将携带GDNF 基因和EDNRB 基因的逆转录病毒载体转染神经干细胞,然后移植于花斑鼠结肠壁内,观察花斑鼠结肠神经再生的情况。本课题旨在探讨多基因联合导入神经干细胞移植对结肠神经再生的机制,为先天性巨结肠治疗提供新的有效办法。