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干涉BmNPV极早期非必需基因ie-2的转基因家蚕系统构建和抗性检测
  • ISSN号:0257-4799
  • 期刊名称:《蚕业科学》
  • 时间:0
  • 分类:S884.51[农业科学—特种经济动物饲养;农业科学—畜牧兽医] Q789[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]家蚕基因组生物学国家重点实验室西南大学,重庆400716, [2]广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,广州510610
  • 相关基金:国家高技术研究发展计划“863”项目(No.2011AA100306,2013AA102507);国家重点基础研究发展计划“973”项目(No.2012CB114600);家蚕基因组生物学国家重点实验室开放课题(No.2012B090600049)
中文摘要:

家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是严重危害家蚕的病原之一。为了探究通过转基因干涉BmNPV非必需基因抑制病毒的增殖,提高家蚕抗性的可行性,选择BmNPV极早期非必需基因ie-2作为靶标,构建转基因干涉载体,通过显微注射获得转基因家蚕系统A4Pie2H-A和A4Pie2H-B。3龄幼虫添食感染BmNPV后,A4Pie2H-A与A4Pie2H-B的幼虫死亡率分别比非转基因对照品种降低19%和24%;定量PCR结果显示A4Pie2H-A与A4Pie2H-B的幼虫体内的ie-2 mRNA表达量分别为非转基因对照品种的50%和20%,病毒DNA含量分别为非转基因对照品种的32%和12%。此外,2个转基因家蚕系统的全茧量和茧层率与正常家蚕品种比较无显著差异。研究结果表明,干涉BmNPV极早期非必需基因ie-2可以显著抑制转基因家蚕体内病毒的复制增殖,使幼虫死亡率降低。

英文摘要:

Bombyx mori nucleopolyhedrovirus(BmNPV) is one of the pathogens causing severe damage to silkworm(Bombyx mori).In an attempt to explore the feasibility of inhibiting BmNPV proliferation and enhancing resistance of silkworm through introducing RNAi targeting nonessential gene of BmNPV,the nonessential gene immediate early-2(ie-2) of BmNPV was chosen to construct transgenic RNAi vector,and to generate transgenic silkworm lines A4Pie2H-A and A4Pie2H-B via microinjection.After oral infection of BmNPV,the mortality rate of the 3rd instar larvae of A4Pie2H-A and A4Pie2H-B decreased by 19% and 24% respectively compared to that of the non-transgenic silkworm.Quantitative PCR revealed that the mRNA level of ie-2 in A4Pie2H-A and A4Pie2H-B was 50% and 20% to that of the non-transgenic silkworm respectively,and the accumulated BmNPV DNA content was 32% and 12% to that of the non-transgenic silkworm respectively.Besides,cocoon weight and cocoon shell rate of the two transgenic silkworm lines had no significant difference with those of the normal silkworm variety.These results showed that RNAi of the nonessential immediate early gene ie-2 could significantly suppress the proliferation of BmNPV and reduce the mortality of transgenic larvae.

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期刊信息
  • 《蚕业科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会 中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:郭锡杰
  • 地址:江苏省镇江市四摆渡中国农业科学院蚕业研究所
  • 邮编:212018
  • 邮箱:CYKE@chinajournal.net.cn
  • 电话:0511-85616835
  • 国际标准刊号:ISSN:0257-4799
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1115/S
  • 邮发代号:28-23
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊,全国农业学会优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:7742