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含his标签水通道蛋白AqpZ的体外表达和功能表征
  • ISSN号:1005-9954
  • 期刊名称:《化学工程》
  • 时间:0
  • 分类:Q816[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]浙江大学化学工程与生物工程学院,浙江杭州310027, [2]山东金城生物药业公司,山东淄博255130
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(21276226,21306164)
中文摘要:

利用大肠杆菌无细胞表达系统可溶性表达含his标签的水通道蛋白Z(AqpZ),并经镍柱亲和层析纯化,浓缩得到质量浓度为490μg/mL的AqpZ。将纯AqpZ重构到DOPC脂质体中,嵌入率为57%。用停留光谱定量分析了AqpZ的滤水功能,测得其水渗透因子Pf值为(258.1±8.9)μm/s,约是对照组未嵌入AqpZ的空脂质体的2.8倍。采用静电吸附、层层自组装的方法制备嵌入AqpZ的仿生纳滤膜。用截留反渗透装置分析其水通量和NaCl截留率,结果表明:与未整合AqpZ的膜相比,嵌入含his标签AqpZ的仿生膜的水通量明显高于对照,且保持较高的截盐率。本研究为进一步研究水通道蛋白和仿生膜打下了坚实的基础。

英文摘要:

Soluble his-tag AqpZ was expressed using E. coli cell-free expression system, and was lately purified by Ni2+ -NTA affinity chromatograph. Finally, 490 μg/mL AqpZ solution was obtained after the concentration. Then the purified AqpZ was reconstituted into DOPC liposomes with the ingerated efficiency (57%). The water channel activity of proteoliposomes was analyzed by stopped-flow. The result shows that osmotic water permeability value of proteoliposomes was (258. 1 ± 8.9) μm/s, about 2.8 times that of the control. The his-tag AqpZ embedded layer- by-layer membrane demonstrated a higher water flux and NaCl rejection because of the presence of AqpZ. This work could be the foundation for the further study of Aquaporins and biomimetic membranes.

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期刊信息
  • 《化学工程》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国华陆工程科技有限责任公司
  • 主办单位:中国华陆工程科技有限责任公司
  • 主编:程惠亭
  • 地址:陕西省西安市高新技术产业开发区唐延南路7号 华陆大厦
  • 邮编:710065
  • 邮箱:chem_eng@chinahualueng.com
  • 电话:029-87989701 27988823/4/6
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-9954
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1136/TQ
  • 邮发代号:52-52
  • 获奖情况:
  • 第六届全国石油和化工行业优秀期刊一等奖,历届陕西省科学技术类优秀期刊,首届《CAJ-CD规范》执行优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:11323