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破色期番茄果实均一化cDNA沉默文库的构建和功能基因筛选模型的初步建立
  • ISSN号:1000-3282
  • 期刊名称:《生物化学与生物物理进展》
  • 时间:0
  • 分类:Q819[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]中国农业大学食品科学与营养工程学院食品生物技术实验室,北京100083
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30600421,30871741).
中文摘要:

番茄果实的成熟是由多基因精细调控的一个过程.利用破色期番茄果实,根据复性动力学原理在mRNA水平进行均一化操作使高丰度和低丰度的mRNA丰度接近.然后把均一化之后mRNA反转录得到cDNA,再与基因沉默载体pTRV重组,最后把构建好的载体通过电转化的方法转入到GV3101农杆菌中,从而建立起破色期番茄果实均一化cDNA沉默文库.通过番茄果实中病毒诱导基因沉默技术,对cDNA沉默文库进行初步筛选,从而确定功能基因筛选模型.在模型建立阶段,以番茄红素合成途径相关的PDS基因作为内标基因,在100个混合农杆菌样中,成功筛选到了PDS基因.

英文摘要:

The ripeness of tomato is regulated by multi-genes. Transcripts of mRNA extracted from tomato at breaker stage were normalized, and cDNA with pTRV was constructed after reverse transcription. In order to construct a normalized cDNA silencing library, a novel procedure was adopted to reduce the abundant copy number and increase the rare copy number. Then the normalized cDNA was put into pTRV vector to construct a cDNA library and this cDNA library was screened with the technology of virus induced gene silencing. PDS, which was related about synthesis of lycopene, was used as marker gene to establish the model of screening. Among one hundred mixed agrobateria, PDS was successfully screened in the first stage of model establishment.

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期刊信息
  • 《生物化学与生物物理进展》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生物物理研究所 中国生物物理学会
  • 主编:王大成
  • 地址:北京市朝阳区大屯路15号
  • 邮编:100101
  • 邮箱:prog@sun5.ibp.ac.cn
  • 电话:010-64888459
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3282
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2161/Q
  • 邮发代号:2-816
  • 获奖情况:
  • 1999年中国期刊奖提名奖,2000年中国科学院优秀期刊特别奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18821