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表面活性蛋白-A对脂多糖诱导的人肾小管近曲上皮细胞白介素-6表达的影响
  • ISSN号:1005-6483
  • 期刊名称:临床外科杂志
  • 时间:2014
  • 页码:767-770
  • 分类:R735.2[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]武汉大学人民医院重症医学科,430060, [2]武汉大学人民医院普外科, [3]上海长征医院急救科
  • 相关基金:国家自然基金青年项目(81201457)
  • 相关项目:表面活性蛋白-A在脓毒症诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用及机制研究
中文摘要:

目的:探讨表面活性蛋白-A(SP-A)的表达改变对脂多糖(LPS)诱导的人肾小管近曲上皮细胞(HK-2细胞)白介素-6(IL-6)表达的影响及机制。方法培养HK-2细胞,ELISA方法检测不同浓度的LPS(0、0.1、1、2、5、10 mg/L)作用8 h及5 mg/L的LPS于不同时间(0、2、4、8、16、24 h)作用HK-2细胞后IL-6蛋白表达的变化;应用脂质体转染法将SP-A SiRNA转染入HK-2细胞,筛选稳定转染细胞株,采用5 mg/L的LPS刺激SP-A SiRNA稳定转染的HK-2细胞8 h,ELISA方法检测细胞上清中IL-6的分泌量,Western印迹检测细胞NF-κB p65蛋白的表达。结果应用1、2、5、10 mg/L的LPS刺激HK-2细胞8 h后,IL-6蛋白表达水平较0、0.1 mg/L的LPS刺激后显著升高(P<0.05);同时,应用5 mg/L的LPS作用HK-2细胞4、8、16、24 h后,IL-6蛋白的表达水平较5 mg/L的LPS作用0、2 h显著升高(P<0.05)。SP-A SiRNA转染的HK-2细胞经LPS刺激后,其NF-κBP65和IL-6蛋白表达较未转染经LPS刺激细胞明显升高(P<0.05)。结论 SP-A可能通过抑制NF-κB p65的表达进而下调LPS诱导的HK-2细胞IL-6的表达,在脓毒症急性肾损伤时发挥保护作用。

英文摘要:

Objective To evaluate the effects and mechanisms of surfactant protein A(SPA)onlipopolysaccharide(LPS)induced interleukin6(IL6)expression in human renal tubular epithelial(HK2)cells.Methods Cultured HK2 cells were treated with various concentrations of LPS(0,0.1,1,2,5and 10 mg/L)for 8 h,and 5 mg/L of LPS at different time point(0,2,4,8,16 and 24 h),and the changeof IL6 expression was tested by the ELISA method.Then HK2 cells were transfected with SPA siRNA.Stable transfected HK2 cells were screened and stimulated with LPS(5 mg/L)for 8 h and NFkB P65 expression was evaluated by Western blot.Results The levels of IL6 expression in HK2 cells treated with1,2,5 and 10 mg/L of LPS were higher than these cells treated with 0 and 0.1 mg/L of LPS.After the 5mg/L of LPS treatment for 4,8,16 and 24 h,their IL6 levels IN HK2 cells were higher than these cellstreated for 0 and 2 h.Compared with those nontransfected LPStreated HK2 cells,the expressions of NFkB P65 and IL6 in the transfected cells were elevated significantly(P 〈0.05).Conclusion By inhibiting the expression of NFkB P6,SPA may downregulate LPSinduced IL6 expression in HK2 cells,which plays a protective role in sepsis and acute kidney injuries.

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期刊信息
  • 《临床外科杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:湖北省卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华医学会湖北分会
  • 主编:
  • 地址:武汉市武昌东湖路165号
  • 邮编:430071
  • 邮箱:whlcwk@126.com
  • 电话:027-87893476
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-6483
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1334/R
  • 邮发代号:38-184
  • 获奖情况:
  • 国家科学技术部中国科技论文统计源期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊
  • 被引量:23776