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在活细胞中应用FRET技术研究TGFβ/TβRI信号传导
  • ISSN号:1007-7626
  • 期刊名称:中国生物化学与分子生物学报
  • 时间:2015.7.20
  • 页码:757-762
  • 分类:R34[医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]石河子大学医学院新疆地方与民族与地方高发病重点实验室,新疆石河子832002, [2]石河子大学医学院第一附属医院检验科,新疆石河子832002, [3]石河子大学医学院第一附属医院骨一科,新疆石河子832002
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.81460338)和石河子大学高层次人才启动基金(No.RCZX201028)项目资助
  • 相关项目:microRNAs调控uPA基因表达在骨关节炎中的作用研究
中文摘要:

转移生长因子β(TβRI)信号传导通路参与调节细胞的增殖、分化、凋亡、细胞迁移等一系列细胞过程,与骨代谢疾病的发病机制密切相关.本研究根据荧光共振能量转移(FRET)技术原理,构建包含CFP-TβRI-YFP融合蛋白的TβRI生物传感器,转染293T细胞,观察转染效率.以TGFβ1为诱导剂,激活TGFβ/TβRI信号传导通路,在活细胞生理条件下,动态监测TβRI生物传感器的FRET效应.结果表明,成功构建了TβRI生物传感器,转染细胞效率达50%,在TGFβ1诱导刺激6min后,FRET效率增加并达到最大值,该过程经历9min后,随时间的延长,FRET效率下降.研究结果表明:在活细胞生理条件下,TGFβ1/TβRI信号转导过程存在一定的时间特异性.

英文摘要:

The interaction between transforming growth factor β (TGFβ) and TGFβ receptor I (TβRI) played a critical role of regulation of a variety of osteoporosis-related processes, such as cell proliferation, differentiation, apoptosis and migration. We constructed a TβRI biosensor in the form of a CFP-TβRI- YFP fusion protein. The TβRI biosensor construct was transfected into the 293T cells at about 50% of efficiency. Fluorescence resonance energy transfer (FRET)of TβRI biosensor were observed in live ceils. Results showed that the FRET ratio of TβRI biosensor was maximized at 6 minutes when the ligand of TGFβ1 was added. The maximum level was kept about 9 minutes ofterward, FRET ratios begin to decrease. Our study showed that the TGFβ1/ TβRI signal transduction pathway might have a characteristic of time delay in living ceils.

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期刊信息
  • 《中国生物化学与分子生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国生物化学与分子生物学会 北京大学
  • 主编:周春燕
  • 地址:北京市学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100083
  • 邮箱:shxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82801416
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7626
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3870/Q
  • 邮发代号:82-312
  • 获奖情况:
  • 被美国《CA》列入世界引用频次最高的《千种表》
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9731