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过表达CDK11^p58促进人胰腺导管腺癌MIAPaCa-2细胞增殖
  • ISSN号:1007-7626
  • 期刊名称:《中国生物化学与分子生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q71[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院生理学系,北京100005
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.30870989); 国家重点基础研究发展规划(973计划 No.2006CB503907); 科技部专项基金资助项目(No.2004CCA01400); 北京市自然科学基金资助项目(No.5062034)
中文摘要:

CDK11^p58属于CDK11/PITSLRE蛋白激酶家族成员,由Cdc2L2编码,是一种重要的细胞周期调控蛋白.为了研究CDK11^p58与胰腺癌细胞增殖的关系,我们通过采用脂质体转染真核表达载体及G418筛选的方式,获得了稳定过表达CDK11^p58的MIAPaCa-2(人胰腺导管腺癌细胞)单克隆细胞,并通过流式细胞分析、MTT检测及real-time PCR的方法检测了细胞周期、细胞增殖能力及G1/S期相关调控基因的转录水平.结果显示,该单克隆细胞(实验组)与空载体组细胞和空白对照组细胞相比G1期细胞比例明显下降(P〈0.01),S期细胞比例明显上升(P〈0.01);细胞增殖能力明显提高(P〈0.01);cyclin D1、cyclin D3、p21基因mRNA水平较两组对照细胞明显升高(P〈0.01).提示过表达的CDK11^p58通过上调cyclin D1、cyclin D3和p21基因的mRNA水平促进MIAPaCa-2细胞通过细胞增殖的关键限速点G1/S期,加快细胞增殖.

英文摘要:

CDK11^p58,a CDK11 /PITSLRE protein kinase family member,is encoded by Cdc2L2,and it plays a crucial role in cell cycle regulation.In order to investigate the relation between CDK11p58 and the proliferation of human pancreatic carcinoma cells,the recombinant eukaryotic expressional plasmid pcDNA3.0-HA-p58 was introduced into human pancreatic ductal adenocarcinoma cell line MIAPaCa-2 by Lipofectamine2000 and the cell was selected by G418.The cell clones which stably overexpress CDK11^p58 were identified by Western blot.Cell cycle,cell proliferation and G1 /S related gene mRNA levels were analyzed by flow cytometry assay,MTT assay and real-time PCR assay,respectively.Results showed that the S phase cell proportion,the proliferation activity and the mRNA level of cyclin D1,cyclin D3,p21 gene in pcDNA3.0-HA-p58 transfected cell were significantly increased compare with the cells in vector group and control group(P 〈0.01).These results indicated that overexpression of CDK11^p58 could accelerate MIAPaCa-2 cell G1 /S progression and promote its proliferation.

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期刊信息
  • 《中国生物化学与分子生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国生物化学与分子生物学会 北京大学
  • 主编:周春燕
  • 地址:北京市学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100083
  • 邮箱:shxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82801416
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7626
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3870/Q
  • 邮发代号:82-312
  • 获奖情况:
  • 被美国《CA》列入世界引用频次最高的《千种表》
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9731