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一种新型通用引物多重PCR技术可特异性检测Y染色体序列标签位点
  • ISSN号:1005-1740
  • 期刊名称:《微循环学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R446.9[医药卫生—诊断学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]武汉大学人民医院检验科,武汉430060
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No:81100959);国家临床重点专科建设项目(财社[2010]305)
中文摘要:

目的:建立通用引物多重PCR(UP-M-PCR)技术,检测 Y染色体微缺失。方法:选取50例健康男性,针对Y染色体AZFa,AZFb,AZFc和AZFd区15个标签位点(STS),选择15对特异性引物和1对UP,将UP加在特异性引物对的5’端,按扩增片段大小组建4组稳定可靠的 UP-M-PCR 体系,分析其扩增效率和特异性。结果:UP引入M-PCR对检测体系无影响。UP-M-PCR可特异性扩增AZF区15个STS,且较M-PCR特异性更好,条带更清晰。结论:UP-M-PCR 体系较 M-PCR 操作方便,扩增效率均衡,特异性高,是男性不育患者 Y 染色体微缺失筛查的新方法。

英文摘要:

Objective:In order to improve the specificity and accuracy of Y chromosome microdeletion's assay, the study will explore a novel universal multiplex PCR instead of traditional multiplex PCR,which will be used for detection of Y chromosome microdeletions.Method:50 healthy men were selected for the study,for detection of 15 tagged sites (STS)of AZFa,AZFb,AZFc and AZFd district in Y chromosome,the study selected 1 5 pairs of spe-cific primers and one pair of universal primers (UP).The UP was added to the 5'end of each specific primer,and es-tablished 4 stable and reliable multiplex PCR reaction sets.Results:The data showed that UP-M-PCR method could specifically amplify the 1 5 STS,and we detected that UP-M-PCR could amplify the 1 5 STS more specifically and ac-curately as well as much clearer banes compared with the traditional M-PCR.Conclusion:The novel universal prim-er-multiplex-PCR (U-M-PCR)method can overcome the disadvantages of traditional multiplex PCR (M-PCR) which showed complex operation,poor specificity and low amplification efficiency.Thus U-M-PCR was a new anal-ysis method for routine screening of male infertility associated with Y chromosome microdeletions.

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期刊信息
  • 《微循环学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:武汉大学人民医院 中国病理生理学会微循环专业委员会
  • 主编:李艳
  • 地址:湖北省武汉市武昌区张之洞路9号
  • 邮编:430060
  • 邮箱:micch@sina.com 308903786@qq.com
  • 电话:027-88075389 18064018058
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-1740
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1321/R
  • 邮发代号:38-201
  • 获奖情况:
  • 中国科技部论文统计源期刊(中国科技核心期刊),第三届国家期刊奖湖北省期刊参评奖,湖北省2000年~2001年、2003年-2004年科技期刊先进集体,第五届国家期刊奖湖北省提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊
  • 被引量:7638