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定向偶联制备三肽囊素人工抗原及其多克隆抗体的研制
  • ISSN号:1000-2286
  • 期刊名称:江西农业大学学报
  • 时间:2013.2.20
  • 页码:156-160
  • 分类:Q785[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]江西农业大学动物科学技术学院,江西南昌330045
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31160498)、江西省自然科学基金(2010GZN0046)和江西省教育厅项目(GJJ11402)资助
  • 相关项目:三肽囊素高密度模拟表位的构建及其模拟机理研究
中文摘要:

为研制三肽囊素(Bursin,KHG-NH2,BS)抗体,采用EDC法将三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA、OVA)定向偶联,分别制备免疫抗原(BSA-KHG-NH2)和检测抗原(OVA-KHG-NH2)。以BSA-KHG-NH2免疫5只BALB/c小鼠,经4次免疫后,均产生了较高的抗体水平,其中5号小鼠血清抗体效价达1∶125 000。免疫小鼠血清多克隆抗体与检测抗原的结合不仅能被三肽囊素阻断,而且能被GKHG-NH2四肽特异性阻断,但不能被KHGK四肽阻断,表明本试验制备的三肽囊素人工抗原是由载体蛋白的羧基与三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基定向偶联而成。利用小鼠多克隆抗体建立了三肽囊素间接竞争ELISA检测方法,线性范围为15~1 000 ng/mL,IC50为160 ng/mL。

英文摘要:

In order to produce polyclonal antibodies against Bursin, and develop immunological detective methods for Bursin (BS) , the amino group on -Lys of Bursin molecules were conjugated to bovine serum al- bumin (BSA) or chicken ovalbumin (OVA) by EDC method. The titer of anti-Bursin antibodies in one BLAB/c mice serum, immunized by BSA-KHG-NH2, was about 1: 125000, in which polyclonal antibodies binding to OVA-KHG-NH2 could be inhibited by free Bursin and GKHG-NH2, could not be inhibited by KH- GK peptide. These results indicated that the immunized mice produced specifical antibodies against bursin, and the amino group on-Lys of Bursin were conjugated to BSA or OVA. A competitive indirect ELISA (CI - ELISA) with the anti -Bursin polyclonal antibodies for detecting Bursin was developed, in which the linear range of the inhibition curve was 15 -1 000 ng/mL, and the IC50 was 160 ng /mL.

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期刊信息
  • 《江西农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:江西农业大学
  • 主办单位:江西农业大学
  • 主编:石庆华
  • 地址:江西省南昌市经开区志敏大道1101号江西农业大学期刊社
  • 邮编:330045
  • 邮箱:ndxb7775@sina.com
  • 电话:0791-83813246 83828010
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2286
  • 国内统一刊号:ISSN:36-1028/S
  • 邮发代号:44-102
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵双百期刊,国家期刊奖百种重点期刊,中国高校精品科技期刊,华东地区优秀期刊,江西省"名刊建设工程"期刊,江西省优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:20807