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麻疯树亚硝基谷胱甘肽还原酶(JcGSNOR)的克隆与功能分析
  • ISSN号:0490-6756
  • 期刊名称:《四川大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064
  • 相关基金:国家自然科学基金(30270090)
中文摘要:

本研究克隆出了麻疯树亚硝基谷胱甘肽还原酶(JcGSNOR)cDNA 的全长序列,并分析了其在麻疯树各部位中的表达情况.结果表明,在所有参试的器官中,JcGSNOR基因皆有表达,其中在种子种表达量最大,其次为根茎,叶表达量最少.对新基因编码蛋白的理化性质进行分析后发现JcGSNOR的分子量约为40.256 kDa ,等电点约为6.74;同源性分析表明,JcG-SNOR基因与其它植物 GSNOR基因核甘酸序列相似度达到80%以上,说明JcGSNOR是GSNOR蛋白家族的一个新发现的成员.同时将JcGSNOR基因与pYES2表达载体相连接后,克隆进酿酒酵母,并经RT-PCR验证后证实得到JcGSNOR的转基因酵母.利用GSNO敏感性实验分析了JcGSNOR的酶学活性.并在GSNO处理条件下,检测了转基因酵母和野生型的生长曲线.结果表明,JcGSNOR对酵母的生长没有明显影响,但能明显提高酵母中GSNOR的活性.

英文摘要:

JcGSNOR was cloned by RT-PCR and RACE techniques from Jatropha curcas .The expres-sion situation of JcGSNOR in different organs of Jatropha curcas was detected by real time PCR .The result showed that ,JcGSNOR was expressed in all tissue detected .The expression level was the highest in the seed ,root and stem were more or less ,and leaf was the least .With bioinformatic analysis ,the JcGSNOR may be comprised of 379 amino acids ,to give the molecular weight of 40 .256 kDa and the pI value of 6 .74;Result analyzed by NCBI showed that ,JcGSNOR has up to 80% similarity with GSNOR of other plants ,which indicated JcGSNOR is a new member of GSNOR family .To identify the biochemi-cal activity of JcGSNOR ,the gene encoding JcGSNOR was cloned into saccharomyces cerevisiae .GSN-OR activity and growth curve of yeast were detected .This study indicated that ,JcGSNOR showed no obvious effect on grow th of yeast ,but enhanced the GSNOR activity significantly .

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期刊信息
  • 《四川大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:国家教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 主编:刘应明
  • 地址:成都九眼桥望江路29号
  • 邮编:610064
  • 邮箱:
  • 电话:028-85410393 85412393
  • 国际标准刊号:ISSN:0490-6756
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1595/N
  • 邮发代号:62-127
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,四川省十佳科技期刊,教育部全国高校优秀学报二等奖(1995,1999),四川省科技优秀期刊一等奖(1996,2000)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10542