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接头相关蛋白复合物3δ亚单位与BRD7的相互作用及其功能
  • ISSN号:1671-6825
  • 期刊名称:《郑州大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:R739.6[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]南阳医学高等专科学校团委,南阳473000, [2]中南大学湘雅医学院肿瘤研究所分子遗传室,长沙410078
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目30300175;30200135;30400238;30470367
中文摘要:

目的:观察鼻咽癌密切相关基因BRD7与接头相关蛋白复合物3(AP3)δ亚单位的相互作用及功能。方法:首先构建AP3δ基因真核表达载体pCMV-HA-AP3δ和pEGFP-C2-AP3δ,然后采用GFP介导的细胞荧光实验考察非洲绿猴肾COS7细胞中AP3δ的亚细胞定位;通过细胞荧光共定位和免疫共沉淀实验分析BRD7蛋白与AP3δ蛋白的相互作用;最后采用荧光素酶实验观察BRD7与AP3δ对COS7细胞E2F3和CyclinD1活性的影响,半定量逆转录PCR观察转染pcDNA3.1-BRD7的HNE1细胞AP3δmRNA的表达,以转染空白载体的HNE1细胞为对照。结果:成功构建了pCMV-HA-AP3δ和pEGFP-C2-AP3δ;AP3δ蛋白主要定位于胞质;AP3δ蛋白与BRD7蛋白存在相互作用。AP3δ基因可协同BRD7下调细胞E2F3和CyclinD1启动子活性。在BRD7稳定转染的HNE1细胞中,AP3δmRNA的表达较转染空白载体组明显上调。结论:AP3δ蛋白与BRD7蛋白存在相互作用,在功能上相互促进。

英文摘要:

Aim: To investigate the interaction and function of BRD7 and adaptor-related protein complex 3δ (AP3δ). Methods:Firstly, pCMV-HA-AP'3δ and pEGFP-C2-AP3δ were constructed. Secondly, the subcellular localiza- tion of AP3δ was detected in COS7 cells by direct GFP fluorescence, and the interaction between BRD7 and AP3δ protein was further confirmed by coimmunoprecipitation and immunocolocalizafion. Lastly, luciferase assay was used to observe the activity of E2F3 and CyelinD1 in COS7 cells after transfected by BRD7 and AP3δ alone or combined, and RT-PCR was used to observe the changes of AP3δ mRNA in HNE1 cells after transfeeted by peDNA3.1-BRD7. Results: pCMV-HA- AP3δ and pEGFP-C2-AP3δ were constructed successfully. AP3δ was mainly located in nuclei of COS7 cells. Compared with BRD7 transfeetion alone,the combination of BRD7 and AP3δ had interactive effects on down-regulating the activity of E2F3 and CyclinD1. Compared with the HNE1 cells transfeeted by blank plasmid, the expression level of AP3B mRNA in- creased in the HNEI cells transfected by peDNA3. I-BRD7. Conclusion : The function of BRD7 and AP3δ protein may be promoted mutually with the interaction between BRD7 and AP3δ protein.

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期刊信息
  • 《郑州大学学报:医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:河南省教育厅
  • 主办单位:郑州大学
  • 主编:辛世俊
  • 地址:郑州市高新区科学大道100号
  • 邮编:450001
  • 邮箱:xzshi@126.com
  • 电话:0371-67781728
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-6825
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1340/R
  • 邮发代号:36-111
  • 获奖情况:
  • 综合性医药卫生类核心期刊,教育部优秀科技期刊一等奖,中国优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:15607