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辐射诱导染色体畸变的快速FISH方法的建立
  • ISSN号:1004-616X
  • 期刊名称:癌变.畸变.突变
  • 时间:2014
  • 页码:123-126
  • 分类:R811.5[医药卫生—放射医学;医药卫生—临床医学] Q691.5[生物学—生物物理学]
  • 作者机构:[1]中国CDC辐射防护与核应急重点实验室 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所,北京100088
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(81172593)
  • 相关项目:GDF15和PIG3基因表达水平变化作为快速辐射生物剂量计的研究
中文摘要:

目的 建立一种检测辐射诱导染色体畸变的快速荧光原位杂交(FISH)方法.方法:两步简并引物PCR法扩增人α-卫60 星DNA,制备荧光基团直接标记的泛着丝粒探针;对Coγ射线照射后的人外周血淋巴细胞染色体标本进行FISH分析,荧光显微镜下检测着丝粒及染色体形态.结果:直接标记泛着丝粒探针杂交后显示所有染色体着丝粒均有较强的信号;应用制备的FISH探针检测到γ射线照射诱导的双着丝粒、着丝粒环和易位染色体畸变,37 ℃杂交5-12 h后经过简单的洗涤即可在荧光显微镜下检测到较好的信号.结论:本研究制备的直接标记泛着丝粒探针,可用于FISH快速检测辐射诱导的染色体双着丝粒体、着丝粒环和易位畸变.

英文摘要:

OBJECTIVE: To establish a rapid fluorescence in situ hybridization (FISH) method and to analyzethe chromosome aberrations induced by irradiation. METHODS:Human centromeric alpha satellite DNA was amplifiedand directly labeled with Cy3-dUTP or Fluorescein-12-dUTP by degenerate oligonucleotide priming-PCR (DOP-PCR) toprepare two pan-centromeric probes. Chromosome aberrations in lymphocytes of healthy irradiated peripheral blood60 samples with Coγ-rays were analyzed with FISH. RESULTS:Two directly labeled pan-centromeric probes hybridizedto the centromeres of all 46 chromosomes. The established rapid FISH method could easily detect chromosome aberrationsafter hybridizing 5 h to 12 h in 37 ℃ and simple washing. CONCLUSION: FISH method established in this study couldbe use to rapidly detect the dicentrics,centric rings,and translocations induced by irradiation.

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期刊信息
  • 《癌变.畸变.突变》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国环境诱变剂学会
  • 主编:程书钧
  • 地址:广东省汕头市新陵路22号汕头大学医学院
  • 邮编:515041
  • 邮箱:office@egh.net.cn
  • 电话:0754-88900267
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-616X
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1063/R
  • 邮发代号:80-285
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:6443