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鳗鲡疱疹病毒的分离与鉴定
  • ISSN号:1000-0615
  • 期刊名称:水产学报
  • 时间:2014.9.15
  • 页码:1579-1583
  • 分类:S941.41[农业科学—水产养殖;农业科学—水产科学]
  • 作者机构:[1]福建省农业科学院生物技术研究所,福建福州350003
  • 相关基金:国家自然科学基金(31101933); 留学人员科技活动择优资助优秀类项目(2013年); 福建省公益类科研院所专项(2009R10035-6)
  • 相关项目:鳗鲡疱疹病毒结构蛋白的鉴定及其在病毒粒子上的定位研究
中文摘要:

为获知鳗鲡"脱粘败血病"与病毒的关系,实验用蔗糖密度梯度离心的方法从发病的欧洲鳗鲡内脏器官组织匀浆液中纯化了病毒粒子,负染后利用电镜观察;进一步用EO细胞对病毒进行了分离、培养,并对感染病毒的细胞进行超薄切片,电镜观察;然后,提取病毒DNA,利用鳗鲡疱疹病毒的PCR检测方法对其进行了鉴定。结果显示,接种匀浆上清液的EO细胞出现细胞融合的病变效应;分离病毒的病毒粒子具囊膜,大小约为200 nm;从感染病毒的细胞上清液DNA中扩增出特异性条带,序列测定与比对分析表明,该序列与鳗鲡疱疹病毒欧洲株(AngHV-1)的序列完全一致。研究表明,利用EO细胞分离了一株鳗鲡病毒,经形态观察和DNA分析,确认该病毒为鳗鲡疱疹病毒,命名为AngHV-FJ。该研究为深入开展鳗鲡疱疹病毒的致病机制及鳗鲡"脱粘败血病"的防控研究奠定了重要基础。

英文摘要:

To clarify whether the "mucus sloughing and hemorrhagic septicemia disease " of cultured European eels,Anguilla anguilla,is related with virus,the internal organs of the diseased European eel were extracted and homogenized,and virions were purified by sucrose density gradient centrifugation; then EO cells were incubated with the supernatant of the tissue homogenate,and the cytopathic effects of cell fusion appeared. In addition,the virus infected cells were thin sectioned,also the negatively stained purified virions were observed by electron microscope to photograph the virus morphology. It showed that the virus was enveloped with size in about 200 nm. Furthermore,DNA were extracted from the supernatant of the infected cells,and used for Anguillid herpesvirus( AngHV) PCR detection,and then the amplified fragment was sequenced and alignment analyzed. The results showed that it was exactly the same sequence with the AngHV European strain,AngHV-1. Therefore,the observation by electron microscope and DNA polymerase gene sequencing confirmed that the isolated virus is an AngHV strain,named AngHV-FJ,which is the first cell isolation in China mainland. The research has laid an important foundation for the study of the pathogenic mechanism of AngHV-FJ and the prevention and control of eels "mucus sloughing and hemorrhagic septicemia disease".

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期刊信息
  • 《水产学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国水产学会
  • 主编:黄硕琳
  • 地址:上海市军工路334号上海水产大学
  • 邮编:201306
  • 邮箱:jfc@shou.edu.cn
  • 电话:021-61900228
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-0615
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1283/S
  • 邮发代号:4-297
  • 获奖情况:
  • 曾先后三次获中国科协专项基金资助,获首届《CAJ-CD规范》执行优秀奖,获水产类期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:26128