位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
鳗鲡疱疹病毒ORF95基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
  • ISSN号:1008-0384
  • 期刊名称:福建农业学报
  • 时间:2012
  • 页码:787-791
  • 分类:S941.41[农业科学—水产养殖;农业科学—水产科学]
  • 作者机构:[1]福建省农业科学院生物技术研究所,福建福州350003, [2]福建农林大学动物科学学院,福建福州350002
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31101933); 福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项(2009R10035-6); 福建省科技平台建设项目(2009N2003)
  • 相关项目:鳗鲡疱疹病毒结构蛋白的鉴定及其在病毒粒子上的定位研究
中文摘要:

鳗鲡疱疹病毒(Anguillae herpesvirus,AngHV)是淡水鳗鲡的主要病毒性疾病病原之一。根据鳗鲡疱疹病毒(AngHV-1)的基因组序列(GenBank:NC-013668)设计引物,扩增鳗鲡疱疹病毒福建株(AngHV-FJ)ORF95基因的开放阅读框序列,克隆至pMD19-T载体;经限制性内切酶酶切和测序鉴定,进一步将其克隆至原核表达载体pET-32a,构建了表达质粒32a-ORF95,将其转化表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导,实现了ORF95在大肠杆菌中的高效表达。在0.1mmol.L-1 IPTG、23℃诱导14h的条件下,可溶性ORF95蛋白的表达量较高,经镍柱纯化获得了高纯度的融合蛋白。

英文摘要:

Anguillae herpesvirus(AngHV)is one of the major viral pathogen of freshwater eels.In this study,the open reading frame of AngHV-FJ ORF95 gene was synthesized according to the gene sequence of AngHV-1 provided by GenBank:(NC-013668),and then cloned into the pMD19-T vector.After restriction digestion and sequence verification,the ORF95 gene was inserted into the prokaryotic expression vector pET-32a to construct the recombinant expression plasmid 32a-ORF95.The plasmid was then transformed into E.coli BL21(DE3) strain to induce expression of ORF95 protein.The soluble ORF95 protein can be highly expressed under the induction of IPTG(0.1 mmol·L-1) at 23℃ for 14h,and then purified by Ni-NTA His.Binding affinity purification.The protein can be used further to understand the characteristic of ORF95 protein and the AngHV prevention.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《福建农业学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:福建省农业科学院
  • 主办单位:福建省农业科学院
  • 主编:刘波
  • 地址:福州市五四路247号省农科院高新大楼401
  • 邮编:350003
  • 邮箱:fjnyxb@163.com
  • 电话:0591-87869455
  • 国际标准刊号:ISSN:1008-0384
  • 国内统一刊号:ISSN:35-1195/S
  • 邮发代号:34-56
  • 获奖情况:
  • 福建省第二届优秀科技期刊二等奖,第二届华东地区优秀期刊奖,全国优秀农业期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9962