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本生烟NbSABP2和NbSAMT基因的克隆及VIGS表达载体构建
  • ISSN号:0490-6756
  • 期刊名称:《四川大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]四川大学生命科学学院,成都610064
  • 相关基金:国家自然科学基金(31071669,31171835,91017004);教育部博士点基金项目(20070610172,20110181110059);中央高校基本科研业务费专项资金(2011SCU04834);四川省科技厅项目(20lOJQ0080);成都市科技局(1lDXYB097JH-027)
中文摘要:

采用RT-PCR技术从本生烟中分别克隆获得水杨酸结合蛋白2(salicylicacid-bind-ingprotein2,SABP2)和水杨酸羧基转甲基酶(SAmethyltransferase,SAM丁)基因的全长序列.利用Gateway定向克隆系统,分别将SABP2和SAMT部分序列片段插入到烟草脆裂病毒(Tobaccorattlevirus,TRV)载体中,构建了重组病毒载体pTRV2-NbSABP2和pTRV2-NbSAMT.将重组载体转化农杆菌GV2260,通过TRV病毒诱导的基因沉默(virus-inducedgenesilencing,VIGS)系统,分别抑制本生烟SABP2和SAMT基因的表达.与TRV2空载体相比,pTRV2-NbSABP2载体浸润的植株生长矮小,叶柄基部和叶脉褐化,叶片向下塌陷;pTRV2-NbSAMT载体浸润的植株生长正常,无明显的表型改变.

英文摘要:

The complete nucleotide sequence of salicylic acidbinding protein 2(SABP2) and SA methyl transferase (SAMT) were obtained from Nicotiana benthamiana using RTPCR (reverse transcription polymerase chain reaction) method in this study. Then partial fragments of SABP2 and SAMT were inserted into tobacco rattle virus (TRV) vector through directional TOPOCloning of Gateway System respectively. Thus the recombinant pTRV2- NbSABP2 and pTRV2-NbSAMT vectors were constructed. They were transformed into cells of Agrobacterium tumefacien GV2260, and the expression of Nb SABP2 and NbSAMT were suppressed through TRV virusinduced gene silencing (VIGS) system. When the plants were infiltrated with pTRV2-NbSABP2, they grew smaller and the leaves collapsed, with browning at the base of petiole or vein compared with TRV2 empty vector Whereas plants infiltrated with pTRV2-NbSAMT grew normal and there was no obvious difference of phenotype.

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期刊信息
  • 《四川大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:国家教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 主编:刘应明
  • 地址:成都九眼桥望江路29号
  • 邮编:610064
  • 邮箱:
  • 电话:028-85410393 85412393
  • 国际标准刊号:ISSN:0490-6756
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1595/N
  • 邮发代号:62-127
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,四川省十佳科技期刊,教育部全国高校优秀学报二等奖(1995,1999),四川省科技优秀期刊一等奖(1996,2000)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10542