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具超强富集U(Ⅵ)能力工程菌E.coli的构建
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:中国生物工程杂志
  • 时间:0
  • 页码:52-55
  • 语言:中文
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]南华大学污染控制与资源化技术湖南省重点实验室,衡阳421001
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(10775065 20707008); 湖南省高校创新平台开放基金项目(09K076)资助项目
  • 相关项目:U(Ⅵ)印迹生物高分子复合磁性微球的制备及其对铀的识别、吸附机理研究
中文摘要:

以鼠伤寒沙门氏菌基因组DNA为模板,PCR扩增得到非特异性酸性磷酸酶基因(phoN),将其克隆到pMD18T-Vector中。用SpeI、NdeI限制性内切酶对重组转移载体T-VectorphoN与穿梭载体pRADZ3分别进行双酶切,再将phoN片段和穿梭载体pRADZ3中的大片段通过T4DNA连接酶连接。经PCR与双酶切双重鉴定,证实重组穿梭载体pRADZ3phoN构建成功。转化Escherichia coliDH5α感受态细胞,使其在正常情况下表达PhoN蛋白,经Western blot证实phoN基因在DH5α中成功表达。利用含pRADZ3phoN的工程菌进行富集U(Ⅵ)实验,结果表明该工程菌对U(Ⅵ)的富集量较宿主菌提高约4倍,达46.16mg/g,去除率为92.32%。

英文摘要:

PhoN gene that was amplified from Salmonella enterica serovar Typhimurium genomic DNA by PCR,was cloned into pMD^18 T-Vector.Recombined transfer vector T-VectorphoN was digested by restriction enzymes of Spe I and Nde I,and then the purified phoN gene was inserted into shuttle vector pRADZ3 which was digested by the same restriction enzymes.The recombined shuttle vector pRADZ3phoN was identified by PCR and restriction analysis,and transformed into E.coli DH5α competent cell.A recombinant fusion PhoN protein was expressed in normal growth condition without induction.The expression of PhoN protein in E.coli DH5α was confirmed by Western blot.The U(Ⅵ) bioaccumulation performance of engineered E.coli was evaluated.The results showed that the maximum U(Ⅵ) bioaccumulation capacity of engineered E.coli increased four times compared to original E.coli,reaching 46.16 mg/g,and the removal rate of U(Ⅵ) was 92.32%.

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期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959