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MALDI-TOF质谱、电泳和透射电子显微镜技术研究魟鱼肝铁蛋白H和L亚基特性
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:O441.4[理学—电磁学;理学—物理] Q959.6[生物学—动物学]
  • 作者机构:[1]厦门大学生命科学学院生物化学与生物技术学系,厦门361005, [2]厦门大学海洋与环境科学学院近海海洋科学国家重点实验室,厦门361005, [3]厦门大学化学化工学院化学生物学系,厦门361005
  • 相关基金:本文系国家自然科学基金(No.30870515)资助项目
中文摘要:

小批量制备质谱纯魟鱼肝铁蛋白(liver ferritin of Dasyatis akajei,DALF),以透射电子显微镜术(TEM)测定DALF、蛋白壳和铁核的分子尺寸。SDS-PAGE技术指出,DALF由H和L两种不同类型的亚基组成。采用肽质量指纹图谱(PMF)技术进一步佐证H和L亚基类型和同源性。氧化还原剂中性红、劳氏紫、甲基紫精和pH1.5酸度均无法削弱DALF的H-L和L-L亚基之间的相互作用强度、并解吸出L亚基离子,供MALDI-TOF质谱仪分析。通过增加激光强度和降低基质pH途径,可直接分析DALF的H和L亚基的分子量,指出DALF中H-L和L-L亚基之间的相互作用强度明显高于H-H亚基类型。

英文摘要:

Liver ferritin of Dasyatis akajei ( DALF ) with mass purity was prepared in batch. Transmission electron microscopy(TEM) was used to determine the molecular sizes of DALF, protein shell, and iron core, respectively. Experimental results of SDS-PAGE method indicated that DALF consisted of two different subunit types, H and L subunits. Moreover, both types of H and L subunits and their homology were further proofed by peptide mass fingerprinting(PMF). The redox reagents such as natural read, thionine, and methyl violo- gen, and the acidity at pH 1.5 have no abilities for making the interaction intensity of both H-L and L-L subunits reduced to form the ions of L subunit for mass analysis with MALDI-TOF MS, respectively. However, using a combined approach of increasing laser intensity and decreasing the matrix pH synchronously, MALDI- TOF mass spectrometric method has the ability for analyzing molecular weights both H and L subunits in DALF, It indicated that the interaction intensity of H-L and L-L subunit types was higher than that of H-H subunit type in DALF.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455