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广西优势血清型IBV代表株M基因在杆状病毒系统中的表达
  • ISSN号:1004-6364
  • 期刊名称:《中国家禽》
  • 时间:0
  • 分类:S855.3[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31360611);广西自然科学基金项目(2014GXNSFDAll8011、2013GXNSFCA019010)
中文摘要:

采用RT-PCR扩增鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西优势血清型代表性毒株Gx-YL5的膜(M)蛋白基因,将其克隆至pFastBacTM/HBM-TOPO杆状病毒转移载体,转化大肠杆菌DHl0Bac感受态细胞,获得重组杆粒rHBM-M;将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒;利用间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白质免疫印迹(Western-blot)鉴定表达的M蛋白。IFA检测可见重组杆状病毒感染后72h细胞出现特异性荧光,Western blot检测可见大小约为26ku的特异性蛋白带,表明该重组M蛋白在Sf9昆虫细胞中成功获得表达。研究为IBVM蛋白的生物学功能、IBV诊断试剂和新型疫苗制备等奠定基础。

英文摘要:

Membrane (M)protein gene of Guangxi representative dominant serotype isolate of avian infectious bronchitis virus (IBV)was amplified by RT-PCR and cloned into pFastBacTM/HBM-TOPO to obtain recombinant transposon vector. The recombinant transposon vector was transformed into DH10Bac to gain recombinant bacmid rHBM-M. The recombinant bacmid rHBM-M was transfected into Sf9 insect cells to obtain recombinant baculovirus. The recombination M protein was detected by indirect immunofluorescence assay (IFA)and Western blot. The results showed that the specific fluorescence was observed in Sf9 insect cells at 72 h post infection of the recombinant baculovirns by IFA and a specific protein band of 26 ku was observed by Western blot, which was indicated that the recombinant M protein was successfully expressed in Sf9 insect cells. It's laid a good foundation for study the biological function of IBV M protein, the development of IBV diagnostic reagents and new vaccine.

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期刊信息
  • 《中国家禽》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:江苏省农林委员会
  • 主办单位:中国家禽业协会 江苏省家禽科学研究所 中国农业科学院家禽研究所
  • 主编:
  • 地址:江苏省扬州市邗江区仓颉路58号
  • 邮编:225125
  • 邮箱:zgjqzz@263.net
  • 电话:0514-87241124 85552323
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-6364
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1222/S
  • 邮发代号:28-87
  • 获奖情况:
  • 全国农口学会优秀期刊奖(1996),第三届全国畜牧兽医优秀期刊一等奖,第三届全国优秀农业期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:15721