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百合鳞茎淀粉磷酸化酶分离纯化及酶学性质研究
  • ISSN号:0513-353X
  • 期刊名称:园艺学报
  • 时间:0
  • 页码:1521-1530
  • 分类:S682.2[农业科学—观赏园艺;农业科学—园艺学]
  • 作者机构:[1]沈阳农业大学园艺学院,设施园艺省部共建教育部重点实验室/辽宁省设施园艺重点实验室,沈阳110866
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30972023);中国博士后科学基金项目(20090451280);辽宁省重点实验室项目(LS2010148)
  • 相关项目:百合鳞茎发育的蔗糖降解模式及关键酶基因的时空表达
中文摘要:

从兰州百合(Lilium davidii vat.unicolor)鳞茎中分离纯化淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)并研究其酶学性质。结果表明:选用30%~60%硫酸铵分级沉淀,SP纯化倍数为14.78,回收率为23%,纯化的SP亚基分子量约62.5kD;SP的最适反应体系缓冲液为pH5.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,最适反应温度为30℃,且体系中不适合加入酚类抑制剂聚乙烯吡咯烷酮(PVP);SP不耐强酸,在中性和弱碱性条件下活性稳定,pH〈5时活性较弱;在合成方向上,SP对葡萄糖-1-磷酸(G-1-P)的Km值为2.84mmol·L-1;1mmol·L-1Mg2+、Ca2+对sP活性有极显著的促进作用,K+、Zn2+也有一定的促进作用;大部分离子在高浓度(〉10mmol·L-1)下抑制sP活性,但Na+随着浓度的升高,对SP活性的促进作用增强;10mmol·L-1的抗坏血酸可将sP活性提高30%。

英文摘要:

Starch phosphorylase (SP) in bulbs ofLilium davidii var. unicolor was purified and its enzymatic properties were studied. The results indicated that SP activity was improved 14.78 fold by 30% - 60% ammonium sulfate fractionation with a final yield of 23% and a subunit of 62.5 kD. The optimal reaction buffer and temperature were citric acid-sodium citrate buffer (pH 5.0) and 30℃, respectively. However, SP was sensible to strong acid and it was not suitable for adding phenolic inhibitors (PVP) to the reaction system. The activity was stable under neutral and alkaline conditions, while decreased under pH 〈 5. In the synthetic direction, Km value for G-1-P was 2.84 retool- L-1. Furthermore, 1 retool- L-1 Mg2+ and Ca2+ promoted SP activity significantly, K+ and Zn2+ also played a promoting role. Most ions with high concentration (〉 10 mmol·L-1) could inhibit SP activity, whereas Na+ enhanced the activity with its concentration increasing. Besides, the enzyme activity increased by 30% while adding 10 mmol·L-1 ascorbic acid to the reaction system.

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期刊信息
  • 《园艺学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国园艺学会
  • 主编:杜永臣
  • 地址:北京市中关村南大街12号
  • 邮编:100081
  • 邮箱:ivfyyxb@mail.caas.net.cn
  • 电话:010-68919523
  • 国际标准刊号:ISSN:0513-353X
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1924/S
  • 邮发代号:82-471
  • 获奖情况:
  • 第一届全国优秀期刊奖,中国科协第三届优秀期刊奖,第二届国家期刊奖提名奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:43371