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牛骨骼肌卫星细胞的分离鉴定和诱导分化
  • ISSN号:1671-7236
  • 期刊名称:中国畜牧兽医
  • 时间:2014.7.20
  • 页码:142-147
  • 分类:Q254[生物学—细胞生物学]
  • 作者机构:[1]西北农林科技大学生物工程研究所,陕西杨凌712100, [2]天津农学院动物科学与动物医学学院,天津300384
  • 相关基金:国家自然科学基金(31201021);天津市自然科学基金(13JCQNJC14600).
  • 相关项目:牛骨骼肌卫星细胞成肌分化相关miRNAs的鉴定和功能研究
中文摘要:

本研究对牛骨骼肌卫星细胞进行体外分离培养、诱导分化和鉴定,采用胶原酶和胰酶联用的酶消化法分离肌卫星细胞,应用差速贴壁法进行纯化,观察卫星细胞及诱导分化后肌管的形态结构,并利用标志基因的反转录PCR(RT-PCR)和免疫荧光染色方法对分化前后细胞进行鉴定。结果显示,分离出的肌卫星细胞呈梭形生长,生长状态良好,RT-PCR和免疫荧光染色显示肌卫星细胞Pax7和MyoD呈阳性表达,纯化后的肌卫星细胞纯度大于93%;诱导分化后,卫星细胞融合生长,形成的肌管状态良好,分化标志基因MyoG和MHC呈阳性表达。本研究建立了一套从牛肌肉组织中分离和鉴定肌卫星细胞的方法,可以为肌肉的发育分化和肉牛肉质改良研究提供良好的细胞模型。

英文摘要:

In this study, bovine skeletal muscle satellite cells were isolated and identified, muscle tissues were digested bycollagenase and trypsinase, then the satellite cells were purified and induced differentiate into myotubes. The muscle satellitecells and myotubes were observed, and detected by RT-PCR and immunofluorescent staining technology. The results showedthat the muscle satellite cells were in healthy morphology, and more than 93 percent of the cells expressed the marker genespaired box protein 7 (Pax7) and myogenic differentiation antigen (MyoD). After myogenesis induction, satellite cells began toconvergence, and finally formed multinucleated myotubes expression of myogenin (MyoG) and myosin heavy chain (MHC).Our results indicated that high purity skeletal muscle satellite cells were successfully isolated and identification, which couldprovide cell source for muscle development and bovine muscle quality improvement study.

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期刊信息
  • 《中国畜牧兽医》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 主编:李琍
  • 地址:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 邮编:100193
  • 邮箱:zgxmsy@caas.cn
  • 电话:010-62816020 62811226 62810371
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-7236
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4843/S
  • 邮发代号:2-215
  • 获奖情况:
  • 1996年被农业部评为“95中国出版成就展”参展期刊...,1998年在首届全国畜牧兽医优秀科技期刊评比中总分...,2002年被中国期刊协会农业期刊分会和中国农学会评...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:22619