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透明颤菌血红蛋白基因在淀粉酶产色链霉菌中的表达及对合成丰加霉素的影响
  • ISSN号:0253-2654
  • 期刊名称:《微生物学通报》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量与检验检疫技术重点实验室,浙江杭州310018
  • 相关基金:浙江省公益技术研究项目(No.2010C32063);浙江省科技创新团队项目(No.2009R500273);浙江省自然科学基金项目(No.LQ12C14004);国家重点基础研究发展计划项目(No.201ICB11602,2012CB114100);国家863计划项目(No.2012AA021601)
中文摘要:

【目的】丰加霉素(Toyocamycin)是核苷类抗生素家族的重要成员,其在农业植物病害防治领域具有巨大的应用价值。为改善丰加霉素生产菌淀粉酶产色链霉菌(Streptomycesdiastatochromogenes1628)发酵过程溶氧限制,旨在实现vgb在S.diastato—chromogenes1628中的表达以促进丰加霉素的生物合成。【方法】首先以g[p为报告基因检测红霉素抗性基因启动子Perm’在S.diastatochromogenes1628中的转录活性,再利用PermE’实现vgb的异源表达。【结果】在荧光显微镜下,重组茵1628一GFP菌丝可发出稳定明亮的绿色荧光,表明启动子PermE’在菌株1628中可有效启动外源基因的表达:通过一氧化碳结合差光谱分析显示VHb具有生物学活性;摇瓶实验表明:与原始菌株相比,重组菌可促进丰加霉素产量的提高,在中度和高度限氧条件下促进效果尤为明显,提高幅度分别为48.9%和104.5%。PCR和发酵效价检测显示重组菌具有良好的遗传稳定性。【结论】成功实现了vgb在sdiastatochromogenes1628中的表达,有效提高了其丰加霉素的合成水平,为丰加霉素的工业化生产提供了基础条件。

英文摘要:

[Objective] Toyocamycin is an important nucleoside antibiotics with diverse bioactivities and potentials for biological control of plant diseases. We expressed the vgb gene encoding Vitreoscilla hemoglobin to alleviate the dissolved oxygen (DO) limitation and to improve the toyocamycin production in Streptomyces diastatochromogenes 1628. [Methods] we used gfp gene as the report gene to test the transcription activity of erythromycin resistance gene promoter PermE* of integrative plasmid plB139. Then, the promoter PermE* was used to drive the gene vgb expression in S. diastatochromogenes 1628. ]Results] Green fluorescent of recombinant strain 1628-GFP was detected by fluorescent microscopy. The promoter PermE* was efficient for heterologous gene expression in S. diastatochromogenes 1628. The vgb gene was also expressed in engineered strain 1628-VHB by the CO-difference spectrum analysis. The engineered strain 1628-VHB improved toyocamycin production under all diverse DO condition. Specially, strain 1628-VHB increased 48.9% toyocamycin production under middle and 104.5% under high limitation DO condition, comparing with the control stain 1628. Meanwhile, strain 1628-VHB was genetically stable by the PCR and toyocamycin yield test from different generation strain, lConclusionl Expression of vgb gene improved toyocamycin production of strain 1628.

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期刊信息
  • 《微生物学通报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:赫荣乔
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路一号院3号中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:xuj@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807511
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-2654
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1996/Q
  • 邮发代号:2-817
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科学技术协会优秀学术期刊三等奖,1992年国家科委中共中央宣传部新闻出版署“全国优...,2000年中国科学院优秀期刊三等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
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