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小鼠sIL-13Rα2在毕赤酵母菌中的表达及初步活性分析
  • ISSN号:1000-484X
  • 期刊名称:《中国免疫学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R392.11[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第四军医大学西京医院呼吸科,西安710032, [2]陕西中医学院第二附属医院耳鼻喉科,咸阳712083, [3]第四军医大学生物技术中心,西安710032
  • 相关基金:本文为国家自然科学基金资助项目(30770926)
中文摘要:

目的:克隆并在毕赤酵母中表达小鼠sIL-13Rα2基因。方法:从小鼠脾脏细胞中提取总RNA,逆转录为cDNA,应用分段PCR的方法将sIL-13Rα2基因定向克隆至酵母表达质粒pPICZα-A,并转染至毕赤酵母菌表达系统进行目的蛋白表达。目的蛋白行SDS—PAGE和Western分析。结果:克隆出可溶性IL-13Rα2目的基因片段,构建重组pPICZα-A/sIL-13Rα2表达载体,成功转染至毕氏酵母菌,诱导表达出可溶性IL-13Rα2目的蛋白。结论:已成功克隆并在毕赤酵母中表达了小鼠可溶性IL-13Rα2目的基因,为应用sIL-13Rα2蛋白治疗哮喘及其他过敏性疾病奠定了基础。

英文摘要:

Objective:To clone and express routine soluble interleukin 13 receptor α2(sIL-13Rα2)gene in Pichia Yeastpastoris. Methods:The total RNA extracted from spleen cells of BALB/c mouse as template, sIL-13Rα2 cDNA enconding extracellular domain of sIL-13Rα2 chain was obtained by RT-PCR. Using eDNA template the cloned target gene was amplified by PCR. Target gene was digested with restriction enzyme and cloned into Pichia Yeast expressing vector. Recombinant plasmids was transfected into Pichia Yeast pastoris for expressing target protein, and the target protein was identificated by SDS-PAGE and Western blot. Results: sIL-13Rα2 target gene was successfully cloned into the recombinant pPICZα-A/sIL-13Rα2 expression vector. The recombinant expressing vector was successfully transfected into Pichia Yeast pastoris, and sIL-13Ra2 protein was positively expressed by identification. Conclusion: Murine sIL-13Rα2 target gene is obtained and reeombinantly expressed into the Pichia Yeast pastoris vector. It may establish the foundation for further application of sIL-13Rα2 in treatment asthma and other allergic diseases.

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期刊信息
  • 《中国免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国免疫学会 吉林省医学期刊社
  • 主编:田志刚
  • 地址:长春市建政路971号
  • 邮编:130061
  • 邮箱:zhmizazh@126.com
  • 电话:0431-88925027
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-484X
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1126/R
  • 邮发代号:12-89
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,中国期刊方阵“双效”期刊,2007年获吉林省新闻出版局期刊精品奖,2006年获中国科协精品期刊资助项目,2004年获首届北方八省优秀期刊奖,2003年中国免疫学杂志荣获第二届国家期刊奖(百种...,2001年中国免疫学杂志成为首批进入"中国期刊方阵"...,获1994年吉林省十佳期刊提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:20795