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干旱胁迫条件下发菜Ferritin差异表达与基因克隆
  • ISSN号:2095-0837
  • 期刊名称:植物科学学报
  • 时间:2012
  • 页码:72-78
  • 分类:Q784[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]宁夏大学生命科学学院,银川750021, [2]福建农林大学生命科学学院,福州350002
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(31060038)
  • 相关项目:发菜耐旱蛋白质分子网络解析及相关基因克隆与表达
中文摘要:

发菜(Nostoc flagelliforme)是一种陆生固氮蓝藻,具有强烈的旱生生态适应性。运用双向电泳技术、凝胶图像分析、MALDI-TOF-TOF/MS质谱鉴定和数据库检索,发现发菜Ferritin在干旱胁迫条件下表达量逐渐降低。根据鉴定的Ferritin已知氨基酸序列设计简并性引物克隆该基因,获得了长度为540 bp的DNA,GenBank登陆号为HM854287。序列比较显示该基因具有较高的保守性,蛋白质二级结构主要由α螺旋和随机卷曲构成。RT-PCR分析表明,Ferritin mRNA在干旱胁迫条件下表达量逐渐降低,与Ferritin的表达趋势一致。将Ferritin基因在大肠杆菌中表达,获得符合预期的外源重组蛋白(22.4 kD)。实验结果可为进一步研究发菜耐旱的分子机理及探讨发菜对极端干旱环境的适应和保护机制奠定基础。

英文摘要:

Nostoc flagelliforme is a terrestrial nitrogen-fixing cyanobacterium with strong drought adaptability.We performed 2-DE analysis,gel image analysis and MALDI-TOF-TOF/MS to compare and identify differential proteins from N.flagelliforme subjected to desiccation.The results indicated that Ferritin,Dps family protein expression quantum gradually declined under desiccation stress.The Ferritin gene was cloned by designed degeneracy primer based on identified amino acid sequences.A full length of 540 bp DNA was obtained(GenBank access number: HM854287).Homology analysis showed that the N.flagelliforme Ferritin gene had high consensus regions.The secondary structures of Ferritin were made up of α helix and random coil.The RT-PCR showed that mRNA of Ferritin gradually declined under drought stress.The Ferritin gene was expressed in Escherichia coli,and a 22.4 kD heterologous protein was observed.The results laid a foundation for understanding the drought-resistant molecular mechanisms and protection mechanisms of N.flagelliforme in extreme arid environments.

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期刊信息
  • 《植物科学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院武汉植物园、湖北省植物学会
  • 主编:李绍华
  • 地址:武汉市武昌磨山中科院武汉植物园内
  • 邮编:430074
  • 邮箱:editor@wegcas.cn; zwkxbjb@wbgcas.cn
  • 电话:027-87510755
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-0837
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1817/Q
  • 邮发代号:38-103
  • 获奖情况:
  • 获“1994-1995”年度湖北省优秀期刊,1997年获第二届全国优秀科技期刊三等奖,2000年获第四届中科院优秀期刊三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:1276