位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
PPM1A蛋白的表达纯化及鼠多克隆抗体制备研究
  • ISSN号:1000-8861
  • 期刊名称:《免疫学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R735.7[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉430030, [2]华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心,武汉430030, [3]武警湖北总队医院感染科,武汉430060
  • 相关基金:国家自然科学基金(30571646)和国家重大基础研究计划(973)(2005CB522901)资助项目
中文摘要:

目的表达、纯化PPM1A-His融合蛋白及制备鼠多克隆抗体。方法将pBEX1-PPM1A-His原核表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS内进行诱导表达,用纯化的PPM1A-His融合蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,并用EHSA、免疫组化和免疫荧光检测抗体的灵敏度和特异性。结果成功表达并纯化了PPM1A-His融合蛋白,纯化后纯度可达90%;EHSA法测定抗体效价为1:100000;免疫组化和免疫荧光结果显示所制备的抗体可特异性检测肝和肝癌细胞的PPM1A。结论获得的PPM1A鼠多克隆抗体有较高的效价和特异性,为PPM1A在肝癌的相关研究打下了基础。

英文摘要:

Objective To express and purify PPM1A-His fusion protein and prepare PPM1A polyclonal antibody. Methods pBEX1- PPM1A-His was expressed in E. coli BL21 (DE3) pLysS trader induction of IPTG. The recombinant protein was purified using Ni-NTA spin column. A polyclonal antibody was developed by immunizing Balb/c mice with the purified fusion protein, and the sensitivity and specificity of the antibody were tested by ELISA, immunohistochemisity, and immunofluorescence technique. Results A high titer ( 1 : 100 000), high sensitivity, and high specificity polyclonal antibody which could recognize human PPM1A in liver tissues and hepatocelhdar carcinoma was prepared successfully. Conclusion PPM1A mouse polyclonal antibody possesses high sensitive and specificity, which can be used for further study of PPM1A in HCC or other diseases.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学 中国免疫学会
  • 主编:吴玉章
  • 地址:重庆市沙坪坝高滩岩
  • 邮编:400038
  • 邮箱:richard@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023-68752237
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8861
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1332/R
  • 邮发代号:78-32
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊三等奖,全军优秀医学期刊奖,重庆市优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:13273