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利用糖芯片研究半乳寡糖与蓖麻凝集素和鸡冠刺桐凝集素间的相互作用
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:Chinese Journal of Analytical Chemistry
  • 时间:2012
  • 页码:1341-1346
  • 分类:TQ645.96[化学工程—精细化工]
  • 作者机构:[1]中国海洋大学 海洋药物教育部重点实验室, [2]山东省糖科学与糖工程重点实验室,青岛266003, [3]江苏雨润肉类产业集团有限公司,南京210041
  • 相关基金:本文系科技部国际合作项目(No.2007DFA30980)、国家自然科学基金(Nos.31070724,91129706)、海洋公益专项(No.201005024)及长江学者与创新团队项目(No.IRT0944)资助
  • 相关项目:海洋类肝素寡糖与糖尿病肾纤维化靶分子CTGF相互作用研究
中文摘要:

建立了用糖芯片技术研究寡糖与凝集素相互作用的方法。以新乳糖-N-四糖(LNnT)、乳糖-N-四糖(LNT)、λ-卡拉胶四糖(L4)和琼胶五糖(A5)为原料,经还原胺化法分别将其与1,2-十六烷基磷脂酰乙醇胺偶联得到拟糖脂,再将其与卵磷脂和胆固醇按4∶2∶5比例混合制备成脂质体后,用全自动芯片点样仪将其点印在硝酸纤维素膜包被的玻片上制成糖芯片,并进行寡糖与凝集素的结合实验。结果表明,蓖麻凝集素(Ricinus communis agglutinin 120,RCA120)特异性识别非还原端糖残基为Galβ(1#4)的寡糖,而鸡冠刺桐凝集素(Erythrina cristagalli lectin,ECL)特异性识别非还原端糖残基为Galβ(1#4)GlcNAc的LNnT。采用接触式芯片点样仪制备糖芯片,并用荧光扫描仪对糖与凝集素结合信号进行检测,增加了灵敏度和准确性。本方法不仅适合于糖与蛋白相互作用的研究,也有助于加快糖类药物的发现。

英文摘要:

A method was established to study the interaction between lectins and galacto oligosaccha- rides by glycochip technology. Four oligosaccharides Lacto-neo N-tetraose (LNnT), Lacto N- tetraose (LNT), 2 carra-tetrasaccharide (L4) and agaro-pentosaccharide (AS), were converted to neoglycolipids (NGLs) by conjugation to 1,2 dihexadecyl sn-glycero-3-phosphoethanolamine (DHPE) via reductive animation. Liposome was prepared with the ratio of 4:2:5 of NGLs: phosphatidylcho- line: cholesterol, respectively. The NGL liposome was printed onto the nitrocellulose membranes coated glass plate to get glycochips, and the interaction of oligosaccharides with lectins was investi- galed The results demonstrated that Ricinus communis agglutinin 120 (RCA,20) bound to the oligo- saccharides whose non-reducing terminal was Gal β(1→4), and Erythrina cristagalli lectin (ECL) only bind with LNnT whose non-reducing terminals were Gal 13(1→4)GlcNAc. The preparation method of glycochip by contactive microarrayer was established, the binding signals of oligosaccharides with lectins were analyzed by fluorescence scanner, and the sensitivity and accuracy were dramatically enhanced. This method is not only suitable for the interaction study between oligosaccharides and proteins, but can also speed up the carbohydrate-based drug discovery.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455