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扁桃AcSFB基因的克隆与原核表达分析
  • ISSN号:0513-353X
  • 期刊名称:园艺学报
  • 时间:0
  • 页码:1215-1220
  • 语言:中文
  • 分类:S662.9[农业科学—果树学;农业科学—园艺学] Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]新疆农业大学农学院,乌鲁木齐830052, [2]新疆农业大学林学与园艺学院,乌鲁木齐830052
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30760146);国家科技支撑计划项目(2007BAD36B01-3)
  • 相关项目:扁桃(巴旦杏)自交不亲和性的分子机理研究
中文摘要:

利用RT-PCR和RACE技术,从新疆栽培扁桃‘鹰嘴’花药中获得了一个全长的SFB(S-hap-lotype-specific F-boxgene)基因(GenBank登录号为FJ362525),命名为AcSFBd。该基因全长1125bp,编码374个氨基酸,在N末端含有一个大约50个氨基酸组成的F-box基序,含有两个高变区(Hva和Hvb)和两个可变区(V1和V2)。生物信息学的方法成功预测了AcSFBd蛋白分子质量为43kD,为亲水性、非分泌型蛋白,在基质内起连接酶(EC6.-.-.-)的作用。成功构建了原核表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE检测结果显示表达了一个约60kD的蛋白。

英文摘要:

Style S-determinants have been determined to be S-RNase and the SFB (S-haplotype-specific F-box gene) alleles are considered to be the first candidates of the pollen S-determinants. A total length SFB gene ( GenBank accession No. FJ362525) named AcSFBd was cloned with RT-PCR and RACE technolgy from the anther of almond Yingzui planted in Xinjiang. AcSFBd was 1 125 bp in length encoding a protein of 374 amino acids. This gene encoded proteins with the F-box motif in the N-amino terminus, and with four (hyper) variable regions, i e. , V1, V2, Hva and Hvb which were similar with S-RNase genes, considered to be recognition site between SFB and S-RNase. With the bioinformatics analysis, the AcSFBd protein was 43 kD, was instable, hydrophilicity and non-secretory protein and had ligase enzyme activity. After transformed to Escherichia coli BL21 and induced by isopropyl-13-D-thiogalactopyranoside (IPTG) , recombinant protein about 60 kD was expressed in pET-AcSFB system and separated by SDS-PAGE electrophoresis.

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期刊信息
  • 《园艺学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国园艺学会
  • 主编:杜永臣
  • 地址:北京市中关村南大街12号
  • 邮编:100081
  • 邮箱:ivfyyxb@mail.caas.net.cn
  • 电话:010-68919523
  • 国际标准刊号:ISSN:0513-353X
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1924/S
  • 邮发代号:82-471
  • 获奖情况:
  • 第一届全国优秀期刊奖,中国科协第三届优秀期刊奖,第二届国家期刊奖提名奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:43371