目的:建立同时测定大鼠血浆中葛根素、阿魏酸和川芎嗪质量浓度的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)方法,为养阴通脑颗粒药动学研究提供准确可靠的方法。方法:制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,再灌注同时灌胃养阴通脑颗粒4个主要有效部位后眼眶取血,血样预处理后,采用HPLC-DAD检测血样中葛根素、阿魏酸和川芎嗪的含量。结果:葛根素、阿魏酸和川芎嗪的进样质量浓度分别在(0.4000-80.0000)mg/L(R2=0.9998),(1.2000-100.0000)mg/L(R2=0.9999),0.04000-20.0000mg/L(R2=0.9990)范围内呈良好的线性关系,平均回收率均在95%-110%之间,日内、日间RSD均<10%,稳定性符合体内药物分析要求。药动学结果显示阿魏酸入血最多,保留最久,T1/2时间最短;葛根素表达峰时间最快;川芎嗪的体内分布最广。结论:所建立的HPLC-DAD测定方法专属性强,分离度好,分析时长适宜,操作简单快速,可用于MCAO大鼠体内葛根素、阿魏酸、川芎嗪含量的同时测定及其药代动力学研究。