位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
Fas基因siRNA.表达质粒的构建及鉴定
  • ISSN号:1671-8348
  • 期刊名称:《重庆医学》
  • 时间:0
  • 分类:R394[医药卫生—医学遗传学;医药卫生—基础医学] R730.5[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学西南医院胸心外科,重庆400038, [2]第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军胸外科中心,重庆400042
  • 相关基金:国家自然科学基金(30772145及30400440)及重庆市科委自然科学基金计划资助项目(CSTC.2006BB5081).
中文摘要:

目的构建肿瘤凋亡基因Fas小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究其对人肺腺癌A549细胞Fas基因表达的阻抑作用,探索Fas/FasL途径在肺癌转移中的作用机制。方法设计有小发夹结构的3条Fas siRNA对应模板DNA序列,退火处理后克隆至pGCsi-U6质粒,构建重组质粒pSi-Fas。将pSi-Fas转染人肺癌A549细胞,采用Western blot检测Fas表达。结果酶切及测序证实质粒pSi-Fas构建成功,可显著抑制A549细胞Fas蛋白表达。结论成功构建的Fas siRNA表达质粒pSi-Fas能抑制人肺癌A549细胞Fas蛋白表达。

英文摘要:

Qbjective To clone the recombinant plasmid of small interfering RNA(siRNA) against Fas gene and to evaluate its activity of inhibiting the Fas expression in human lung carcinoma A549 cells, and explore the mechanism of Fas/FasL pathway on lung cancer metastasis. Methods Three Fas siRNA template DNA sequences were designed and synthesized. The annealed siRNA template was inserted into pGCsi-U6 plasmid, which was transfected into A549 cells with limpofectin 2000,The effect of pSi-Fas on the Fas expression of human lung carcinoma A549 cells was detected by Western blot. Results It was confirmed by restrictive enzyme digestion and sequence analysis that the recombinant plasmid was cloned and the aim sequence was obtained. The Fas expression was inhibited at protein levels by the recombinant pSi-Fas. Conclusion Fas siRNA expression plasmid pSi-Fas successfully constructed,which can inhibit the expression of Fas protein in human lung carcinoma A549 cells.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《重庆医学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:重庆市卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:重庆市卫生信息中心
  • 主编:吴开明
  • 地址:重庆市渝北区回兴唐家沟宝环路420号
  • 邮编:401120
  • 邮箱:
  • 电话:023-61965157
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8348
  • 国内统一刊号:ISSN:50-1097/R
  • 邮发代号:78-27
  • 获奖情况:
  • “中国科技论文在线”2011年“一等奖”,2012年重庆市新闻出版局“重庆报刊发展专项基金”
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:91150