用辣根过氧化物酶(HRP)单酶先后标记Fos和酪氨酸羟化酶(TH),用二氨基联苯胺(DAB)增强剂和DAB分别呈色;以及同时用碱性磷酸酶(AP)和HRP双酶分别标记TH和Fos,再分别用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)和氯化硝基四氮唑蓝(NBT)对TH和DAB对Fos呈色,比较免疫双标时两种不同酶标记显色方法对研究大鼠孤束核(NTS)内儿茶酚胺能神经元在束缚-浸水应激中作用效果的影响.两种显色方法的免疫阳性神经元都清晰易辩,结果应激组NTS内Fos,TH及Fos/TH双标阳性神经元数目均显著增加.但HRP单酶双底物显色系统耗时长、非特异性着色强,在抗体种属来源不同时可优先考虑使用HRP/AP双酶双底物显色.