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外源质粒电击转入Pseudomonas putida的条件研究
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:《中国生物工程杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q785[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]石河子大学农学院/新疆兵团化工绿色过程重点实验室,石河子832003, [2]北京理工大学生命科学与技术学院生物工程系,北京100081
  • 相关基金:国家自然科学基金(20776017)、新疆维吾尔自治区高新技术重点项目(200811108)资助项目
中文摘要:

以自行筛选的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)(命名为Rs-198,Genbank登录号为FJ788425)为受体菌,将具有卡那霉素抗性标记的大肠杆菌.假单胞菌穿梭质粒PDSK519通过电转化法导入到受体菌中,对细胞生长状态、电转化温度、质粒DNA及感受态细胞浓度、电击电压及电转化介质给予转化效率的影响进行研究。结果表明,在细胞生长至OD咖为0.5左右时收集菌体,在低温条件下制备浓度为4.6×10^12/ml的感受态细胞,以0.3mol/L的蔗糖为电转化介质,在13kV/cm的场强下电击能获得较高的转化效率,最高可达1.3×10^7个转化子/μgDNA。为构建恶臭假单胞的遗传转化系统,利用基因工程手段为该菌的进一步研究奠定了理论基础。

英文摘要:

Pseudomonas putida isolated relieving salt stress and promoting plant growth was used as the recipient strain. Optimum conditions including growth stage of the strain, concentration of competent cell, electroshock voltage and the meduim were investigated for the electroporation of P. putida-E, coli shuher vector PDSKS19 into P. putida Rs-198. It was showed that the highest transformation efficiency was up to 1.3 × 10^7CFU/μL g DNA in the optimium condition, under which the competent cells were collected at logarithmic growth phase( OD600 =0.5), the mixture of the competent cells(4.6 ×10^12/ml) and PDSKS19 plasmid DNA was electroporated at 13kV/cm. It will be very helpful for developing a genetic transformation system and studying the genomic function of P. putida.

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期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959