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HSPC238相互作用蛋白RPL5的初步筛选
  • ISSN号:1000-484X
  • 期刊名称:《中国免疫学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R392[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]南方医科大学第三临床医学院南方医科大学附属中山博爱医院,中山528403, [2]南方医科大学附属中山市博爱医院产前诊断中心,中山528403, [3]南方医科大学附属中山市博爱医院中心ICU,中山528403
  • 相关基金:国家自然科学基金(81101534); 广东省自然科学基金(S2012010010824); 广东省医学科研基金(A2013875)项目资助.
中文摘要:

目的:构建HSPC238诱饵载体,筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。方法:基因合成法合成HSPC238基因,sfiIA和sfiIB双酶切后与pGBKT7诱饵载体连接,获得诱饵质粒pGBKT7-HSPC238,经测序鉴定后与酵母双杂交空质粒pGBKT7共同转化到酵母菌株AH109,在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-HSPC238的自激活作用,进一步从人胎肝cDNA文库中筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。结果:诱饵载体pGBKT7-HSPC238构建成功,经表型筛选检测无自激活作用,经酵母双杂交技术结合文献分析,从人胎肝cDNA文库中初步筛选发现核糖体蛋白L5(Ribosomal protein L5,RPL5)可能是HSPC238相互作用的目标蛋白之一。结论:成功构建pGBKT7-HSPC238诱饵质粒载体,且经酵母双杂交技术结合文献分析发现RPL5可能是与HSPC238相互作用的目标蛋白之一。

英文摘要:

Objective: To construct a bait vector for HSPC238,and to screen the target proteins which interact with the HSPC238. Methods: Gene synthesis method was used to synthetic gene HSPC238,then connected with the pGBKT7 vector after digesting by the sfiIA and sfiIB,to obtain the bait plasmid pGBKT7-HSPC238,then transferred into the yeast strains AH109 with the empty plasmid pGBKT7 after sequencing,to observe its self-activating effect in the nutrient deficiencies medium,and further to screen the target proteins which interact with HSPC238 from the human fetal liver cDNA library. Results: The bait vector pGBKT7-HSPC238 was successfully constructed,and it had no self-activating effect through the phenotypic screening,after the yeast two-hybrid technology with literature analysis,we preliminary screened and found that the ribosomal protein L5( RPL5) may be the one of the target proteins which interacted with HSPC238 from the human fetal liver cDNA library. Conclusion: We successfully constructed the bait plasmid vector PGBKT7-HSPC238,and after the yeast two-hybrid technology with literature analysis,we preliminary screened and found that the ribosomal protein L5( RPL5) may be the one of the target proteins which interacted with HSPC238.

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期刊信息
  • 《中国免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国免疫学会 吉林省医学期刊社
  • 主编:田志刚
  • 地址:长春市建政路971号
  • 邮编:130061
  • 邮箱:zhmizazh@126.com
  • 电话:0431-88925027
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-484X
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1126/R
  • 邮发代号:12-89
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,中国期刊方阵“双效”期刊,2007年获吉林省新闻出版局期刊精品奖,2006年获中国科协精品期刊资助项目,2004年获首届北方八省优秀期刊奖,2003年中国免疫学杂志荣获第二届国家期刊奖(百种...,2001年中国免疫学杂志成为首批进入"中国期刊方阵"...,获1994年吉林省十佳期刊提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:20795