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短期暴露于纳米SiO2对HaCaT细胞基因组DNA甲基化的影响
  • ISSN号:1000-8020
  • 期刊名称:《卫生研究》
  • 时间:0
  • 分类:Q555[生物学—生物化学] R994.6[医药卫生—毒理学;医药卫生—药学]
  • 作者机构:[1]深圳市慢性病防治中心,深圳518020, [2]深圳市疾病预防控制中心
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30972505,81202239);深圳市重点项目(No.200901017)
中文摘要:

目的探讨纳米SiO2对体外培养细胞基因组总体DNA甲基化水平的影响。方法分别以2.5、5、10μg/ml纳米Si02溶液和10μg/ml微米级Si02处理人皮肤表皮细胞系(HaCaT)24h;以3μmol/LDNA甲基化转移酶抑制剂5.脱氧杂氮胞苷(DAC)处理48h的10μg/ml组为阳性对照,并设立溶剂对照组。应用高效毛细管电泳(HPCE)定量分析纳米SiO,处理细胞24h后,基因组DNA总体甲基化的变化,用Q-PCR和WesternBlot方法检测甲基化相关蛋白mRNA和蛋白的表达变化,并用DNA甲基化转移酶活性试剂盒检测DNA甲基化转移酶的活性。结果HPCE定量分析结果显示纳米SiO2可引起HaCaT细胞总体甲基化程度降低,呈剂量依赖性关系;与正常细胞相比,微米Si02以及2.5、5和10μg/ml纳米Si02组分别降低37.8%、43.9%、54.9%和52.8%,差异有显著性(P〈0.05);对照组5-aza—dC处理后使HaCaT细胞甲基化程度减少27.3%。各组酶的蛋白表达与mRNA表达水平及DNMTs活性变化具有相同的变化趋势,经纳米SiO2处理的HaCaT细胞,DNMTl、DNMT3a及MBD2表达随着纳米SiO2剂量的上升而下降,DAC组表达水平最低。结论纳米SiO2能引起HaCaT细胞整体基因组DNA甲基化水平降低,可能与DNA甲基化转移酶的酶活性降低有关。

英文摘要:

Objective To observe the effect of SiO2 nanoparticles on genome DNA methylation profile in cultured ceils. Methods HaCaT cells were treated with nm-SiO2 at 2.5, 5 and 10μg/ml and micro-SiO2 at 10μg/ml for 24h and DAC treatment was given at 101μg/ml group for 48h. The mC/(mC + C) percent was quantified by high performance capillary electrophoresis (HPCE) assay, and the expression level of mRNA and protein was detected by Real-time Q-PCR and westernblot assay. The activity of DNMTs was determined by DNA Methyltransferase Activity/Inhibition Assay Kit. Results HPCE assay showed that nm-SiO2-treated cells were decreased in some degree. An averageproportion of methylated mC/ (mC + C) was 4.82% in control, 2.7% in 2.51μg/ml and 2. 17% in 10μg/ml groups, while 3.1% in micro-SiO2 groups, which got the consistent downtrend of genome methylation level during increasing nm-SiO2 dose nanoparticles. The mRNA expression level for DNMT1 decreased gradually with increased dose of nm-SiO2 nanoparticles. The alterations at protein level were similar to those at the mRNA level. Conclusion Genomic DNA methylation levels were decreased in HaCaT cells after short term exposure to SiO2 nanoparticles.

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期刊信息
  • 《卫生研究》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中国疾病预防控制中心
  • 主编:段国兴
  • 地址:北京市西城区南纬路29号
  • 邮编:100050
  • 邮箱:wsyj2012@126.com
  • 电话:010-83132376 83132329
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8020
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2158/R
  • 邮发代号:82-720
  • 获奖情况:
  • 国家双百期刊,第二届国家期刊奖百种重点期刊,1997年《卫生研究》荣获第二届全国优秀期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:22260