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纳米二氧化硅对HaCaT细胞中PAPR-1基因表达及其启动子甲基化的影响
  • ISSN号:1001-9391
  • 期刊名称:《中华劳动卫生职业病杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R751[医药卫生—皮肤病学与性病学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]深圳市慢性病防治中心,518020, [2]深圳市疾病预防控制中心, [3]上海市疾病预防控制中心
  • 相关基金:国家自然科学基金(81202239);深圳市科技计划项目(201401070)
中文摘要:

目的研究纳米二氧化硅(nm—SiO2)对人皮肤表皮细胞系(HaCaT)细胞中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(poly[ADP-ribose]polymerase 1,PARP-1)基因的表达及其基因启动子区甲基化的影响。方法分别以2.5、5.0、10.0μg/ml的nm-SiO2溶液和10μg/ml的微米级SiO2(micro-SiO2)溶液处理HaCaT细胞24h;以3μmol/LDNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza—CdR,DAC)处理48h10μg/ml的HaCaT细胞为阳性对照(DAC组),并设立溶剂对照组(CTRL组)。应用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白质印迹法(Western-blot法)检测PARP-1在mRNA水平和蛋白水平的表达变化,应用亚硫酸氢盐测序(bisulfite pyrosequence,BSP)法检测PARP-1基因启动子区CpG岛的甲基化状态。结果HaCaT细胞暴露nm-SiO224h后,经nm-SiO2处理后,micro-SiO2染毒组和2.5μg/ml染毒组PARP-1表达与CTRL组的差异无统计学意义(P〉0.05),与CTRL组比较,5、10μg/ml染毒组及DAC处理组细胞的PARP-1表达下调,差异有统计学意义(P〈0.05),且其下调水平随着浓度的增大而增高。BSP结果显示PARP-1启动子区-229点甲基化状态升高。结论nm-SiO2可以降低HaCaT细胞中PARP-1基因的表达,可能与其对PARP-1基因启动子区CpG岛的甲基化影响有关。

英文摘要:

Objective To study the effect of silicon dioxide nanoparticles on the expression and promoter region CpG islands methylation of (Poly [ADP-ribose] polymerase 1, PARP-1 ) gene in human HaCaT Cell. Methods HaCaT Cells were treated with nm-SiO2 at 0, 2.5, 5 and 10 μg/mL and micro-SiO2 at 10 μg/ml for 24 h and DAC treatment was given at 10 μg/ml group for 48 h. Real-time PCR and western blot assay was used to detect the expression of PARP-1 mRNA and protein. BSP (Bisulfite Pyrosequence, BSP)assay was used to detect the promoter region CpG islands methylation status of PARP-1 gene. Results After exposure to nano- SiO2 particles, compared to CTRL group, the mRNA and protein expression of PARP-1 in micro-SlOE and 2.5 μg/ml group unchanged, but he mRNA and protein expression of PARP-1 in 5,10 μg/ml as well as DAC group was down-regulated and there are statistical significance between CTRL group and 5,10 μg/ml as well as DAC group and the PARP-1 promoter region CpG islands showed methylation. Conclusion nano-SiO2 can downregulate PARP-1 expression in HaCaT Cell and this is associated with the change in the methylafion of PARP-1 gene promoter region CpG islands induced by nano-SiO2 particles.

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期刊信息
  • 《中华劳动卫生职业病杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中华医学会
  • 主编:
  • 地址:天津河东区华越道6号
  • 邮编:300011
  • 邮箱:cjoh1983@163.com
  • 电话:022-24333581
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-9391
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1094/R
  • 邮发代号:6-50
  • 获奖情况:
  • 2000年中华医学会优秀期刊银奖,2000年天津市优秀期刊奖,2001中华预防医学会优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2000版)
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