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人神经母细胞瘤株SH—SYSY中calcineurin比活性测定的最佳条件
  • ISSN号:0476-0301
  • 期刊名称:《北京师范大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学] S858.31[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:北京师范大学生命科学学院, 北京市基因工程药物及生物技术重点实验室,北京100875
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(G30772558,G30470393,J0630642)
中文摘要:

研究了在人神经母细胞瘤株SH—SY5Y中calcineirin比活性测定的最佳条件.以RⅡ为底物,在测活缓冲液中,Ca^2+和岗田酸(okadaic acid,OA)的加入是必须的,这与在脑组织中的测定是不一样的,同时进一步确定了需要加入的OA是100nmol·L^-1.在细胞破碎液中,calcineurin比活性的测定值是以缓冲液Ⅰ(含Ca^2+与OA)中测得CN比活性数值减去缓冲液Ⅱ(含EGTA与OA)中所测比活性数值之差来表示.

英文摘要:

Effects of Ca^2+ and OA on calcineurin (CN) activity in SH-SY5Y cell extracts were investigated with RⅡ phosphopeptide as substrate. Data showed that adding Ca^2+ to assay buffer Ⅰ was necessary to activate CN in SH-SY5Y cell extracts, which was unlike extracts from brain. Further, it was necessary to add OA to assay buffers to inhibit PP1 and PP2A in SH-SY5Y cell extracts, with an optimal OA concentration of 100 nmol.L^-1, which was also unlike the brain extracts. In conclusion, calcineurin phosphatase activity in SH-SY5Y cell extracts should be calculated as the difference in protein phosphatase activity in buffer Ⅰ (cantains Ca^2+ and OA) and buffer Ⅱ (cantains EGTAand OA)".

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期刊信息
  • 《北京师范大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:北京师范大学
  • 主编:刘文彪
  • 地址:北京新外大街19号
  • 邮编:100875
  • 邮箱:JBNUNS@bnu.EDU.CN
  • 电话:
  • 国际标准刊号:ISSN:0476-0301
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1991/N
  • 邮发代号:82-406
  • 获奖情况:
  • 1997年全国第二届科技期刊评比一等奖,1999年教育部优秀科技期刊二等奖,1999年首届国家期刊奖,中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10672