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羊口疮病毒B2L基因DNA疫苗载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达
  • ISSN号:1002-2694
  • 期刊名称:中国人兽共患病学报
  • 时间:2013.10.15
  • 页码:951-954
  • 分类:S855.3[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,国家口蹄疫参考实验室,兰州730046
  • 相关基金:国家自然科学基金(NSFC一31201914);国家现代肉羊产业技术体系(CARS-39)
  • 相关项目:羊传染性脓疱病毒(ORFV)强、弱毒感染宿主细胞差异蛋白鉴定及功能分析
中文摘要:

目的为构建羊传染性脓疱病毒(ORFV)B2L基因真核表达质粒并验证B2L基因在BHK-21细胞中的表达及表达的稳定性。方法以ORFV主要免疫原性基因B2L为目标,以pVAX1为表达载体,构建重组真核表达质粒pVAX1-B2L,鉴定正确后转染仓鼠肾细胞(BHK-21),通过间接免疫荧光试验(IFA)验证B2L基因表达。结果扩增出目的片段经序列测定和分析证明为ORFVB2L基因,经双酶切鉴定和序列测定分析证明了pVAX1-B2L质粒的正确性,IFA证实目的基因在BHK-21细胞中能够瞬时表达。结论为进一步研制基于羊口疮病毒B2L基因的DNA疫苗奠定了基础。

英文摘要:

The objective is to construct DNA vaccine carrier for ORFV B2L gene and confirm its expression in BHK-21 cells. In this study, B2L gene and pVAX1 expression vector were used to construct recombinant eukaryotic expression plasmid pVAX1-B2L. BHK-21 cells were transfected with pVAX1-B2L plasmid using liposome, and the expression of B2L gene in BHK-21 cells was proved by indirect immunofluorescence assay (IFA). The results indicated that B2L gene was amplified and confirmed by sequencing and analysis l recombinant plasmid pVAX1-B2L was validated by sequencing and two enzymes diges- tion; instantaneous expression of B2L gene was verified with IFA. This paper would lay the foundation for further research to- ward DNA vaccine based on B2L gene from ORFV.

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期刊信息
  • 《中国人兽共患病学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国微生物学会
  • 主编:严延生
  • 地址:福州市津泰路76号
  • 邮编:350001
  • 邮箱:rsghb@fjcdc.com.cn
  • 电话:0591-87552018
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-2694
  • 国内统一刊号:ISSN:35-1284/R
  • 邮发代号:34-46
  • 获奖情况:
  • 中国基础医学核心期刊,中国生物医学核心期刊,中国科学引文数据库列为来源期刊及统计源,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9000