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稳定转染hCysLT_2受体的HEK293细胞株的构建及其受体拮抗剂的初筛
  • ISSN号：1008-9292
  • 期刊名称：浙江大学学报(医学版)
  • 时间：2011
  • 页码：123-130
  • 分类：R[医药卫生]
  • 作者机构：[1]浙江大学医学院药理学系
  • 相关基金：国家自然科学基金资助项目(30772561,30873053,81072618); 浙江省科技计划重点资助项目(2005C23041)
  • 相关项目：半胱氨酰白三烯受体2对脑缺血损伤后小胶质细胞激活的调节作用及机制
作者： 林卡娜|王欣欣|黄雪琴|蔡蓓蕾|方三华|卢韵碧|张纬萍|魏尔清|
关键词： 半胱氨酸, 半胱氨酰白三烯, 受体, 白三烯, 白三烯拮抗剂, HEK293细胞, 细胞内钙
中文摘要：

目的:构建稳定转染hCysLT2受体的HEK293细胞株,并初筛具有CysLT2受体拮抗活性化合物。方法:采用Lipofectamine 2000将质粒pcDNA3.1(+)-hCysLT2转染至HEK293细胞中,用96孔板有限稀释法挑选阳性单克隆细胞株,以RT-PCR和免疫荧光法检测hCysLT2基因的表达。稳定表达hCysLT2受体的HEK293细胞株,以激动剂LTD4诱导细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)增高为指标,初步筛选有拮抗作用的化合物。结果:转染后的HEK293细胞中挑选12个单克隆细胞株,11株高表达hCysLT2受体。阳性刺激物ATP为50μmol/L及LTD4 100 nmol/L能升高[Ca2+]i。AP-2100984抑制LTD4诱导的hCysLT2-HEK293细胞[Ca2+]i升高,CysLT1受体选择性拮抗剂无抑制作用。新合成化合物DXW2、DXW3、DXW4、DXW5、DXW9、DXW25、DXW26、DXW29、DXW35在1μmol/L能显著抑制LTD4引起的[Ca2+]i升高,其中DXW4和DXW5的IC50分别为0.25μmol/L和7.5μmol/L。结论:成功构...

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期刊信息
  • 《浙江大学学报：医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:浙江大学
  • 主编：罗建红
  • 地址：杭州市天目山148号
  • 邮编：310007
  • 邮箱：zdxbyxb@zju.edu.cn
  • 电话：0571-88272797
  • 国际标准刊号：ISSN：1008-9292
  • 国内统一刊号：ISSN：33-1248/R
  • 邮发代号:32-2
  • 获奖情况:
  • 三次全国高校优秀自然科学学报评比先后荣获二等奖...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘（网络版）,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊（2008版）,中国北大核心期刊（2011版）,中国北大核心期刊（2014版）
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