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应用定量竞争RT-PCR筛选芳香烃受体基因RNA干扰片段
  • ISSN号:1000-8020
  • 期刊名称:《卫生研究》
  • 时间:0
  • 分类:R730.261[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学] R730.1[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]广州医学院化学致癌研究所,广州510182, [2]暨南大学药学院基因组药物研究所
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.30371196,30200235);广东省重点科技攻关资助项目(No.2002830104);广东省医学科研资助项目(No.B2001075);广州市教委项目(No.01-34)
中文摘要:

目的 筛选对人气管上皮细胞株16HBE芳香烃受体基因mRNA表达有效抑制的特异RNAi片段。方法 自行制备内参照为竞争模板,应用定量竞争RT-PCR方法,分别检测转染有4个不同芳香烃受体基因RNA干扰位点的16HBE细胞芳香烃受体mRNA的表达,评价不同片段的RNA干扰效果。结果 转染4种芳香烃受体基因RNA干扰片段的16HBE细胞的每40ng总RNA芳香烃受体基因mRNA平均表达量分别为5.65fg、14.78fg、3.14fg和0.68fg,mRNA表达平均抑制率分别为61.6%、-0.5%、78.6%和95.4%。结论 应用定量竞争RT-PCR准确地定量基因的mRNA表达水平,筛查出芳香烃受体基因RNA干扰有效序列,为进一步研究芳香烃受体基因的功能创造了条件。

英文摘要:

Objective To evaluate and screen the specific RNAi fragments which can effectively inhibit Aryl hydrocarbon receptor(AHR) gene mRNA expression in human bronchial epithelial cell line (16HBE). Methods AHR mRNA of 16HBE cells transfected 4 different AHR gene interfere sites were determined quantitatively with the quantitative comoetitive RT-PCR by using self-preoared internal standard as comoetitive temolates, and the RNA interfere effect was evaluated. Resets AHR ,nRNA average expression per 40ng total RNA of 16HBE cells transfected 4 different AHR gene interfere fragments were 5.65fg, 14.78fg, 3. ldfg and 0.68fg respectively, the average rates of inhibition were 61.6%, -0.5%, 78.6% and 95.4% respectively. Conclusion AHR gene specific effective RNA interfere sequence ware screened by quantitative competitive RT-PCR which could accurately quantify gene mRNA level, and offered condition for studying the gene function of AHR.

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期刊信息
  • 《卫生研究》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中国疾病预防控制中心
  • 主编:段国兴
  • 地址:北京市西城区南纬路29号
  • 邮编:100050
  • 邮箱:wsyj2012@126.com
  • 电话:010-83132376 83132329
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8020
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2158/R
  • 邮发代号:82-720
  • 获奖情况:
  • 国家双百期刊,第二届国家期刊奖百种重点期刊,1997年《卫生研究》荣获第二届全国优秀期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:22260