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伪狂犬病病毒gE基因主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立
  • ISSN号:1001-411X
  • 期刊名称:《华南农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.65[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]华南农业大学兽医学院,广东广州510642
  • 相关基金:国家自然科学基金(31001074)
中文摘要:

【目的】为了区分伪狂犬病病毒疫苗免疫猪和自然感染猪,建立快速诊断的方法.【方法】利用PCR方法从伪狂犬病病毒中扩增出糖蛋白E(g E)基因的主要抗原表位区,用Bam HⅠ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体p ET-32a(+)中,构建重组表达质粒p ET-g E184,并转化至大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,用纯化后的g E184蛋白作为包被抗原,建立间接g E184-ELISA检测方法.【结果和结论】用该方法检测290份临床猪血清样本,并与商品化ELISA试剂盒检测结果比较,两者的符合率为93.1%.

英文摘要:

【Objective】To distinguish pseudorabies virus( PRV)-infected pigs from those vaccinated with glycoprotein E( g E)-negative vaccine,the method of rapid diagnosis was established. 【Method】The g E gene fragment of PRV containing the main antigen region was amplified by PCR and cloned into the prokaryotic expression vector p ET32a( +) to establish the recombinant plasmid p ET-g E184. The recombinant plasmid was transformed into Escherichia coli BL21( DE3). After being induced with IPTG,the target protein was identified by SDS-PAGE and Western-blot. Wells of ELISA plates were coated with purified recombinant protein g E184 to establish the indirect g E184-ELISA. 【Result and conclusion 】Two hundred ninety clinical porcine sera samples have been detected by this ELISA. Compared with commercial ELISA Kit,the coincidence rate was 93. 1%.

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期刊信息
  • 《华南农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:华南农业大学
  • 主办单位:华南农业大学
  • 主编:陈晓阳
  • 地址:广州天河区五山路483号
  • 邮编:510642
  • 邮箱:journal@scau.edu.cn
  • 电话:020-85280069 38746672
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-411X
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1110/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 广东省第三届优秀科学技术期刊奖(2000),全国高校优秀科技期刊一等奖(2004),第三届国家期刊奖百种重点期刊(2004),中国高校精品科技期刊(2006)
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:16179