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SUMO-β-抑制蛋白2融合基因的克隆、表达与蛋白纯化
  • ISSN号:1001-3555
  • 期刊名称:《分子催化》
  • 时间:0
  • 分类:Q813[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]天津农学院基础科学学院,天津300384, [2]南开大学生命科学学院,天津300071
  • 相关基金:南开大学药物化学生物学国家重点实验室开放基金项目“重组胰高血糖素样肽-1纳米控释体的研究”(20163001);国家自然科学基金青年项目“具有开关功能胰岛素载体的制备及葡萄糖响应性的研究”(21404082);天津农学院大学生创新创业训练计划项目“多拷贝功能互补型双元促胰岛素的构建及其降糖活性的研究”(201610061074)
中文摘要:

2型糖尿病是一种常见的慢性疾病,其发生与胰岛素的耐受相关。β-抑制蛋白2(β-arrestin2)的缺失或功能紊乱,会导致胰岛素抵抗和2型糖尿病的发生。而使用β-arrestin2进行治疗可明显缓解葡萄糖不耐受及胰岛素抵抗。本研究通过重组PCR方法,将小分子泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)与β-arrestin2基因融合,再将融合基因插入原核表达载体p ET22b中,成功构建了p ET22b-SUMO-β-arrestin2表达载体,将重组表达载体转入大肠杆菌Rosetta Blue(DE3)宿主细胞,使用IPTG在温度为20℃诱导表达,再将诱导表达后的蛋白经Ni-NTA进行纯化,成功获得SUMO-β-arrestin2蛋白,为后续β-arrestin2药效学的研究奠定基础。

英文摘要:

Type 2 diabetes is acommon chronic disease, and it is associated with insulin resistance. Loss or dysfunction of β-arrestin2 results in the development of insulin resistance and progression of type 2 diabetes. However, administration of β-arrestin2 significantly amend glucose intolerance and insulin resistance. In this article, We fused SUMO and β-arrestin2 gene with recombinant PCR methods, and then inserted it into pET22b vector, and constructed a expression vector pET22b-SUMO-β-arrestin2 successfully. A recombinant expression plasmid was expressed in Rosetta Blue (DE3) line of E.coli with IPTG at the temperature of 20 ℃. The SUMO-β-arrestin2 fusion protein was purified with Ni-NTA successfully. Lay the foundation for subsequent pharmacodynamic research of β-arrestin2.

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期刊信息
  • 《分子催化》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院兰州化学物理研究所
  • 主编:李树本
  • 地址:兰州市天水路18号
  • 邮编:730000
  • 邮箱:fzch@licp.cas.cn
  • 电话:0931-4968226
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-3555
  • 国内统一刊号:ISSN:62-1039/O6
  • 邮发代号:54-69
  • 获奖情况:
  • 1992年获中国科学院优秀期刊三等奖,1992年获甘肃省第二届优秀科技期刊荣誉称号
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:7932