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应用多重PCR技术鉴定我国6个旋毛虫地理株的研究
  • ISSN号:1000-7423
  • 期刊名称:《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R383.15[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]郑州大学医学院寄生虫学教研室,郑州450052
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.30671834);河南省重点科技攻关项目(No.072102310014)
中文摘要:

目的对我国猪源旋毛虫地理株进行鉴定和分类。方法根据旋毛虫rDNA扩展片段V区(expansion segment Vregion,ESV)和内转录间隔区(internal transcribed spacers.ITS)ITS1和ITS2基因序列合成5对特异性引物.以旋毛虫(Trichinella spiralis,T1)、乡土旋毛虫(T.nativa,T2)、布氏旋毛虫(T.britovi,T3)、伪旋毛虫(T.pseudospiralis,T4)及纳氏旋毛虫(T.nelsoni,T7)的国际参考株作为对照,应用多重PCR对我国6个猪源旋毛虫地理株(河南、云南、哈尔滨、黑龙江同江、湖北及天津)进行鉴定,并观察影响多重PCR扩增的因素。结果我国6个猪源旋毛虫地理株多重PCR扩增结果显示,均具1条与T1相同的条带(173bp)。应用多重PCR对单条旋毛虫幼虫、不同保存条件的旋毛虫幼虫及含幼虫的新鲜小鼠肌肉提取液进行扩增,均得到173bp的特异性条带。结论经多重PCR鉴定我国6个猪源旋毛虫地理株均为T1。

英文摘要:

Objective To identify and classify six isolates of swine-originated Trichinella from China. Methods Five specific pairs of primers were synthesized based on DNA sequence of expansion segment V region and internal transcribed spacers (ITS1 and ITS2) of ribosomal DNA repeat from Trichinella. International reference strains of five Trichinella species [Trichinella spiralis (T1), T. nativa (T2), T. britovi (T3), T. pseudospiralis (T4) and T. nelsoni(T7) ] were used as control. Six swine TrichienUa isolates from Henan, Yunnan, Harbin, Tongjiang of Heilongjiang, Hubei and Tianjin were identified by multiplex PCR and its effecting factors of PCR amplification were observed. Results Electrophoresis results of multiplex PCR products of Trichinella larvae showed that the band (173 bp) of the six isolates was the same as T. spiralis(T1). The specific band (173 bp) was detected by multiplex PCR through amplification from issues of single T. spiralis larva, the larvae conserved in 80% ethanol for 6 months, the larvae stored in 10% formaldehyde, in 0.05% formaldehyde, 0.2% sodium azide or 0.05% merthiotate for 2 weeks, or fresh mouse muscle with larvae. Conclusion All the six swine Trichinella isolates are identified as T. spiralis (T1) by multiplex PCR.

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期刊信息
  • 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
  • 主编:汤林华
  • 地址:上海市瑞金二路207号右楼3F
  • 邮编:200025
  • 邮箱:zgjsczz@vip.163.net
  • 电话:021-54562376
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-7423
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1248/R
  • 邮发代号:4-362
  • 获奖情况:
  • 1997年被中华预防医学会评为先进编辑部,2000年荣获中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖,2001年荣获中华预防医学会2001年优秀期刊二等奖,2003年荣获2001-2002年中华预防医学会系列杂志优...,2009年获“百种中国杰出学术期刊”奖,2010年荣获上海市科技期刊审计优秀奖,2011年遴选为第二届“中国精品科技期刊”,获第三届“RCCSE中国权威学术期刊”,2013年荣获国家卫生计生委首届优秀期刊,2013年荣获第四届华东地区优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:11792