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新型反相/强阴离子交换混合模式材料用于磷酸化肽富集
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:Q559.9[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]大连医科大学药学院,大连116044, [2]大连医科大学基础医学院,大连116044
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.21505015);辽宁省教育厅科学研究重点项目(No.LZ2016001);大连市支持高层次人才创新创业计划(No.2016RQ041);辽宁省自然科学基金(No.20170540286);国家留学基金(No.201608210312)资助
中文摘要:

生物样品中的糖蛋白丰度低,且在检测中易受到其它非糖蛋白的抑制和干扰,需在分析检测前对糖蛋白进行富集,但常规的基于固相材料的糖蛋白富集方法不易与生物技术中最经典的酶联免疫吸附法(ELISA)兼容。本研究以树枝状聚合物PAMAM 4.0为载体,结合硼酸亲和技术,制备了新型水溶性硼酸亲和富集材料(DBC),并将其应用于基于ELISA的人肝微粒体中糖蛋白的检测。采用标准糖蛋白对DBC富集条件进行优化,然后考察其灵敏度和抗干扰能力,将优化后的方法应用于复杂样品人肝微粒体糖蛋白富集。结果表明,DBC对糖蛋白的富集选择性可高达100000倍,可将糖蛋白的富集信号提高100倍。以DBC为富集材料,与ELISA分析技术相结合,只需一步简单的孵育,即可实现生物样品中糖蛋白的高灵敏度、高选择性检测,为疾病相关的糖蛋白组学研究提供了一种有效的检测手段。

英文摘要:

The glycoproteins in the biological sample are low abundance and are susceptible to be inhibited and interfered by other non-glycoproteins. An enrichment step is usually required before the glycoprotein analysis,but the operation steps of conventional solid-phase-based glycoprotein enrichment methods are difficult to be compatible with the most classical enzyme-linked immune sorbent assay( ELISA) technique. In this study,a novel water-soluble dendrimer based boronic acid capture( DBC) material was developed using PAMAM 4. 0 as the carrier and boronic acid as the affinity group. The method was applied to the detection of glycoproteins in human liver microsomes using ELISA. In this study,the DBC enrichment conditions were optimized by model glycoprotein,and then its sensitivity and anti-interference ability were investigated. This method was applied to the enrichment of glycoproteinsin human liver microsomal. The results showed that the enrichment selectivity of DBC for glycoprotein could be up to 100000 folds,and the enrichment signal of glycoprotein could be increased by 100 times. Therefore,the ELISA method using DBC as a novel enrichment material for glycoprotein had high sensitivity and selectivity in detection of biological samples with only one simple incubation step,which was useful for glycoproteins researches.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455