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金鱼胚胎蛋白质双向凝胶电泳方法建立及优化
  • ISSN号:1000-3282
  • 期刊名称:《生物化学与生物物理进展》
  • 时间:0
  • 分类:Q51[生物学—生物化学] Q81[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]湖南信息职业技术学院,湖南长沙410200, [2]湖南师范大学生命科学学院,湖南长沙410081
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(90408017)
中文摘要:

以金鱼胚胎为材料,以不同样品制备方式、裂解液成分、固相pH梯度胶条的选择、凝胶浓度为侧重点,建立并优化金鱼胚胎总蛋白质组最佳双向凝胶电泳技术条件。研究表明,采用匀浆器匀浆含硫脲和NP-40裂解液提取蛋白,应用pH值为3~10的非线性IPG胶条和浓度14%的SDS-PAGE凝胶进行双向电泳,经优化电泳电流、时间等参数后,获得了重复性和分辫率理想的金鱼胚胎总蛋白质双向电泳图谱,为金鱼胚胎蛋白质组分析奠定了基础,为揭示金鱼单倍体发育异常的机制提供了技术保障。

英文摘要:

To develop and optimize a two-dimensional (2-DE) gel electrophoresis condition for gold{ish embryos proteome, total protein of goldfish embryos is extracted, and the optimal conditions for sample preparation and 2-DE are screened by comparing the following parameters: embryos broken methods, contents of lysis buffer, the concentration of gel, and linear or non-linear immobilized pH gradient gels. The results demonstrate that a satisfactory 2-DE map with good repetition and resolution is obtained and suitable conditions for 2-DE are established, with the conditions of the homogenate of goldfish embryos, adjusting IPG pH from 3 to 10 non-linear immobilized pH gradient gels and using 14 % SDS-PAGE gel as well as optimizing electrophoresis current, time and other parameters. The results paves a way for analysis of global protein profile in goldfish embryos, and lays a technological foundation for further study in the developmental mechanism of goldfish gynogenetic haploid embryos.

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期刊信息
  • 《生物化学与生物物理进展》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生物物理研究所 中国生物物理学会
  • 主编:王大成
  • 地址:北京市朝阳区大屯路15号
  • 邮编:100101
  • 邮箱:prog@sun5.ibp.ac.cn
  • 电话:010-64888459
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3282
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2161/Q
  • 邮发代号:2-816
  • 获奖情况:
  • 1999年中国期刊奖提名奖,2000年中国科学院优秀期刊特别奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18821